广州管圆线虫感染长爪沙鼠动物模型的实验分析

广州管圆线虫感染长爪沙鼠动物模型的实验分析

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1、中文摘要③组织病理变化观察检查感染后不同时间长爪沙鼠的脑和肺组织,肉眼观察其组织病理变化特点;将本实验部分长爪沙鼠脑和肺组织制作石蜡切片,用于其病理变化的镜下观察。④粪便检查在感染后的第45d,用生理盐水直接涂片法在显微镜下对实验组和对照组所有存活的长爪沙鼠粪便进行检查。⑤长爪沙鼠血清特异性IgG抗体动态变化采集对照组和实验组长爪沙鼠感染后不同时间的血清,用广州管圆线虫成虫粗抗原包被96孔ELISA板,采取间接ELISA方法检测长爪沙鼠血清中特异性IgG抗体的水平及分析其动态变化。5、药物治疗效果的观察实验于感染后第8d对治疗组长爪沙鼠经灌胃给予阿苯达唑,连续给药3d,未治疗

2、组只给予蒸馏水。观察并记录两组长爪沙鼠的存活情况,同时对死亡的未治疗组沙鼠进行检查。在感染后第26d剖杀所有存活的此两组长爪沙鼠,取脑和肺组织,观察和比较其病理变化,查找并计数虫体,比较两组之间的差异。研究结果:1、对感染敏感性的观察①与未感染的对照组比较,长爪沙鼠在感染后先表现为精神萎靡、食欲减退,后出现脊柱侧弯、步态不稳、打转和瘫痪等神经系统受损症状。②三组长爪沙鼠大约在感染后第22d开始出现死亡。感染组1、感染组2和感染组3,50%感染沙鼠死亡的时间分别约为感染后第26d,27d和第28d。至感染后第30d上述三组的死亡率分别约为85%、75%和60%。此外,体重较大者

3、死亡率较低。而对照组长爪沙鼠未出现死亡,且摄食和活动正常。③长爪沙鼠对广州管圆线虫感染极为敏感,且耐受感染的能力较差。因此,本研究选择以10条幼虫/鼠进行感染。2、实验组感染情况的观察①一般状况:实验组长爪沙鼠在感染后第8d就开始有不同程度的萎靡、活动减少、食欲减退等症状;约第16d有一部分长爪沙鼠出现毛发倒竖、脊柱侧弯、闭眼、不活动等症状;感染后第17~18d,部分长爪沙鼠出现步态不稳、打转和偏瘫等神经系统症状,并且随着时间的推移,出现这些症状的长爪沙鼠的数3万方数据广州医科大学硕士学位论文量在不断增加,它们的症状也逐渐加重,而且还出现了不同程度的饮水和进食困难。而对照组长

4、爪沙鼠一般状况良好,摄食活动正常。②死亡情况:在感染后第22d就开始出现长爪沙鼠死亡,死亡的高峰时间为感染后的第23~30d。至感染结束时,除了剖杀和死亡外,实验组最终有12只长爪沙鼠生存至感染后第46d;而对照组长爪沙鼠未出现死亡。③虫体检查:实验组长爪沙鼠于感染后第7d在脑和肺组织中均未能检获到虫体;感染后第22~46d之间共检查长爪沙鼠35只(包括死亡鼠),从其脑和肺组织中共检获虫体127条(♀62/♂65),虫体收获率约为36.29%(127/350),平均虫数为3.63±1.46/鼠。感染后第23~30d检获虫体数最多。对照组长爪沙鼠的脑和肺组织均未检获到广州管圆线

5、虫。④虫体组织分布:在实验组感染长爪沙鼠中,感染后第22~25d80%以上的虫体集中在脑,约20%在肺;感染后第30~35d40%的虫体在脑,而60%的虫体在肺;感染后第41~46d大约10%的虫体在脑,而90%以上的虫体在肺。⑤组织病理变化:肉眼观察显示,实验组长爪沙鼠感染后第7d脑组织的病理变化不太明显。感染后第10d,脑组织表面可出现较明显的充血。感染后第23d,长爪沙鼠以脑部病变为主,脑组织水肿,表面有不同程度的充血、出血、血管扩张与粘连;而肺部组织呈弥漫性充血改变。感染后第30~46d,以肺部病变为主,肺组织有不同程度的局灶性充血肿胀,表面及切面质硬粗糙呈灰白色颗粒

6、状,还可见到点状、小片状出血灶;而脑组织只有局限性血管扩张和充血。病理切片镜下观察结果显示,感染后第27d,在切片中可见到脑膜增厚、边缘粗糙,蛛网膜下腔有虫体,虫体周围有出血,而且还有大量嗜酸性粒细胞浸润现象;感染后第39d,肺内可见多个椭圆形广州管圆线虫虫卵,虫卵为多细胞期或幼虫期;病灶处肺泡轮廓大部消失,且有大量渗出和炎症细胞浸润,呈以虫卵为中心的肉芽肿性炎症改变。⑥粪便检查和对应的虫体寄生情况:在感染后第45d,对实验组12只长爪沙鼠进行粪便检查,从4只沙鼠粪便中发现广州管圆线虫Ⅰ期幼虫,约占1/3。从上述12只长爪沙鼠的肺动脉中均能检获到虫体,有6只长爪沙鼠为雌雄虫寄

7、生,在这6只长爪沙鼠中有4只粪便可以查到广州管圆线虫Ⅰ期幼虫,其中2份粪便在镜下可见到大量幼虫,而另外2份粪便幼虫较少(均为1条/片);另外64万方数据中文摘要只长爪沙鼠为肺部单性虫体寄生,在它们的粪便中均未查到广州管圆线虫Ⅰ期幼虫。而对照组的长爪沙鼠粪便中未查到Ⅰ期幼虫。⑦血清特异性IgG抗体的动态变化:长爪沙鼠血清中特异性IgG抗体水平于感染后第7d时就已经开始轻微升高,在感染后的第30d达到高峰,随后在第37d和45d水平又呈下降趋势。且从感染后第15d开始OD值实验组/对照组>2.1。3、药物治

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