紫外-可见分光光度计

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1、紫外－可见分光光度计（一）仪器特点与用途紫外--可见光谱仪涉及的波长范围是0.2－0.8微米（对应波数50000－12500cm-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。（二）基本工作原理利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的

2、特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。（三）仪器的基本组成部件紫外--可见分光光度计的基本结构：是由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统。u测定过程：由光源发出的光，经单色器获得一定波长单色光照射到样品溶液，被吸收后，经检测器将光强度变化转变为电信号变化，并经信号指示系统调制放大后，显示或打印出吸光度A（或透射比T），完成测定。样品槽电源插座打印机接口RS232接口电源开关TU-1810

3、SPC紫外可见分光光度计（四）操作步骤TU-1810SPC紫外可见分光光度计操作规程一、开机：开打印机电源—➛开光度计电源—➛开计算机电源。二、点击UVWin图标进行仪器自检。（一）光谱扫描：1.点击［光谱扫描窗口］—➛选择［测量］菜单下［参数设置］：（1）［参数设置］：在［M测量］下［光谱扫描光度方式］处选Abs—➛在［显示范围］的［最大］处填1.000，［最小］处填0.000—➛在［扫描参数］的［起点］、［终点］输入相应波长（小、大），在［速度］处选快，［间隔］处选0.1nm—➛在［扫描方式］的［自动扫描］处打√—➛在［自动切换样品

4、池］处打√—➛在［扫描完成自动适应窗口］处打√—➛在［显示全部光谱］处打√—➛点击［确定］。（2）附件设置：在样品池中放入标准样品—➛［样品池］选八联池—➛将•置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—➛将•置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—➛将•置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—➛将•置于第一位置—➛点击［复位］—➛点击［确定］。2.光谱扫描：点击［基线］—➛放入空白样品池—➛点击［确定］—➛点击［开始］—➛放入空白样品池—➛点击［确定］。3.查看光谱信息：选择［图形］菜单下的

5、［光谱信息］或点击按纽—➛点击任意一条光谱线，在右侧的详细信息窗口中会显示其详细信息。4.保存测量文件：（1）点击［文件］—➛点击［另存为］—➛［保存在］B8Z盘上—➛［文件名］标准曲线—➛［保存文件类型］光度测量数据。（2）点击［注释］—➛在［分析员］处输入实验人员名字—➛在［样品名］处输入所做标准曲线名称—➛在［注释］处输入要注释的内容—➛点击［确定］—➛点击［保存］。（二）、光度测量：1.点击［定量光度窗口］—➛选择［测量］菜单下［参数设置］：（1）［参数设置］：在［M测量］下的［波长］处输入波长值—➛点击［添加］—➛在［重复测量

6、］下选［自动］—➛在［根据样品池数量自动重复测量］处打√—➛在［光度模式］处选Abs—➛在［起始标号］选1—➛点击［确定］。（2）附件设置：在样品池中放入标准样品—➛［样品池］选八联池—➛将•置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—➛将•置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—➛将•置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—➛将•置于第一位置—➛点击［复位］—➛点击［确定］。2.光度测量：点击［自动校零］—➛放入空白样品池—➛点击［确定］—➛点击［开始］—➛放入空白样品池—➛点击［确定］。3

7、.保存测量文件：同上。（三）定量测定：1.点击［定量测定窗口］—➛选择［测量］菜单下［参数设置］：（1）参数设置：点击［单波长法］—➛在［主波长］处输入测定波长—➛在［样品编号］在标准样品和未知样品标号处输入1长—➛在［其他设置］下［自动切换样品池］处打√—➛点击［确定］。（2）校正曲线选项：在［曲线方程］选Abs=f(c)—➛在［方程次数］选一次—➛［浓度单位］选mg/L—➛［零点插入］打√—➛［曲线评估］选R2—➛［校正方法］选浓度数法—➛点击［确定］。2.标准曲线测定：（1）在样品池中放入标准样品。（2）附件设置：在［样品池］选八

8、联池—➛将•置于［位置］第一位置，在［类型］（序号1）处选空白—➛将•置于［位置］的第二位置，在［类型］（序号2）处选样品，依次类推—➛将•置于［位置］的不使用的位置上，点击［类型］选未使用—➛将•置于第一