尖尾芋水提物抑制小鼠乳腺癌生长与诱导thp-1细胞分化作用

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1、南方医科大学2009级博士学位论文尖尾芋水提物抑制小鼠乳腺癌生长与诱导THP．1细胞分化作用AlocasiacucullatawaterextractssuppressbreastcancergrowthinmiceandinducedifferentiationofmonocyticTHP一1cells课题来源：香港浸会大学StrategicDevelopmentFund(No．SDF080306／P01)专业名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员中药举I，一、，0彭求贤莫志贤教授史珏副教授蔡红兵副研究员梁荣能教授于荣敏教授张文清教授翁建霖教授张继

2、平教授史珏副教授莫志贤教授蔡红兵副研究员论文评阅人刘法锦研究员余林中教授孙学刚研究员2012年4月1El广州博士学位论文尖尾芋水提物抑制小鼠乳腺癌生长与诱导THP-1细胞分化作用博士研究生：彭求贤指导老师：莫志贤教授史珏副教授蔡红兵副研究员摘要研究背景：恶性肿瘤是危害人类生命和健康最严重的疾病之一，且其发病率呈逐年上升趋势。据世界卫生组织(WHO)和美国临床肿瘤学会(ASCO)统计，全世界新发生的癌症病人为1000万，死于癌症的病人在600---700万之间，平均占死亡总数的12％。在发达国家居民常见死亡原因中居第一位(占总死亡数的22．3％)，发展中国家居第二

3、位(占总死亡数的9．5％)。根据卫生部公布的统计数据资料表明，近年来，我国恶性肿瘤的发病率逐年攀升。2008年，恶性肿瘤在我国城市地区的死亡率已达166．97／10万，占总死因的27．12％。在我国部分城市和农村，恶性肿瘤已经由原本的第三位死亡原因已跃升至第一位，首次成为导致居民死亡的“第一杀手”，超过了分列二三位的脑血管病和心脏病。世界卫生组织在第18届国际抗癌联盟大会上的报告指出：今后20年肿瘤新患者人数将由目前的1000万／年增加到1500万／年，癌症死亡的人数也将由每年600万增至1000万。肿瘤对患者身体上造成的痛苦、给家庭带来的经济负担及对摘要社会造

4、成的破坏是难以估量的。因此，WHO和我国政府己将治疗癌症药物研究列为急需解决的重点课题之一。近年来，世界各国均投入了大量的人力和物力对肿瘤进行研究，研制了许多疗效可靠的药物，如环磷酰胺、5．FU、顺铂等。但由于这些药物毒副作用较大，影响了它们的临床应用。随着回归自然热潮的兴起，从自然界中获得天然的抗肿瘤药物成为研究的热点，已陆续开发出20余种治疗肿瘤的植物药，它们分别为生物碱(如长春碱、喜树碱、三尖杉酯碱等)、木脂素(如鬼臼毒素的半合成衍生物)、柄型大环化合物(如美登木素)、二萜类化合物(如紫杉醇、冬凌草甲素)等。它们大多疗效确切，毒副作用较小。说明从天然植物药

5、中寻找抗肿瘤新药具有巨大的潜力。大量的研究结果已经证实，肿瘤的发生及扩散与人体免疫系统功能的缺失及病变有着极大的关系。此外，抗肿瘤药物对肿瘤的作用也与免疫系统的激发有重要的依赖关系。因此从提高患者免疫功能着手控制肿瘤细胞的生长与扩散，不但对肿瘤会有标靶性的治疗效果，而且能使人体免疫系统得到修复和增强。中药强调提升人体本身的机能以对抗疾病，这与免疫型抗癌的机制十分相近，因此本项目旨在探寻一种通过免疫细胞的抗癌性分化的中草药。尖尾芋为天南星科植物尖尾芋Alocasiacucullata(Lour．)Schott．的根茎，该植物广泛分布于我国广东、广西、贵州、云南、四

6、川等省区。为中国植物图谱数据库收录的有毒植物之一，中药名为b芥，有清热解毒，消肿镇痛功效；用于治疗多种肿瘤、流感、高热不退、钩端螺旋体病、毒蛇咬伤、毒蜂螫伤、慢性支气管炎等。目前对其药用价值关注甚少，多数药用功效只限于民间使用和记载，缺乏系统深入的药理研究，也影响了它的进一步开发和利用。研究目的：本课题对尖尾芋进行水提，在对其成分分析时发现其多糖含量高，故进一步纯化尖尾芋多糖，找出尖尾芋多糖的纯化工艺。然后建立小鼠乳腺癌模型，考察尖尾芋抗肿瘤作用，并考察对黑色素瘤小鼠的生存时间，对正常小鼠的急博士学位论文性毒性作用。最后用细胞模型，证明尖尾芋具有诱导细胞分化作用

7、，并找出与细胞分化的相关细胞因子。本课题研究不仅验证民间用尖尾芋抗肿瘤的科学性，也为从尖尾芋中开发出新型高效低毒、价格适中的天然抗肿瘤药物提供依据。研究方法：l尖尾芋水提物制备及多糖纯化工艺1．1提取：取新鲜尖尾芋根茎，洗净切碎，置于604C烘箱烤干。粉碎，过筛。称取1000g尖尾芋粉末，沸水提取两次，加水量分别为12mL·g～，10mL·g-1生药，每次4h，滤过，合并滤液，浓缩至约1000mL，放冷，抽滤。真空冷冻干燥机干燥，得尖尾芋水提粗品，称重，计算收率，备用。、1．2多糖的组分分析取尖尾芋提取物，水解后加入固体碳酸钡中和，浓缩。用D．果糖，D．葡萄糖，

8、L．鼠李糖，D．木糖，D