加味青蒿鳖甲汤对髓系mrd-l患者cd34+细胞源dc诱导过程中il-2、sil-2r的影响

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1、分类号UDC密级学校代码!Q鱼鱼2学位论文加味青蒿鳖甲汤对髓系MRD—L患者CD34+细胞源DC诱导过程中IL．2、slL一2R的影响国家自然科学基金课题指导老师姓名：董垫明申请学位级j

2、lll：亟±专业名称：虫酉医结金!直压论文提交日期：茎Q!窒生圣旦论文答辩日期：茎Q!星玺墨旦学位授予单位和日期：寅田主医堂院窒Q!Q生鱼旦——贵阳中医学院硕士学位论文相关声明原创性声明本文声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经

3、发表论文中撰写过的研究成果，也不包含为获得贵阳中医学院或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确说明。懈锄i1啊日期：◇D，许rfJ月y钼关于学位论文使用授权说明本文了解贵阳中医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其他手段保存学位论文；学校可根据国家或贵州省有关部门规定送交学位论文。作者签名：／易叫匆导师签日期：彻谚f月形日贵阳中医学院硕士学位论文摘要目的：

4、本实验用加味青蒿鳖甲汤的含药血清和相关细胞因子共同体外培养，将从完全缓解期的急性髓系白血病(AML—CR)患者骨髓中分离出的CD34+细胞，诱导生成树突细胞(DC)，观察DC诱导培养的不同阶段观察各组血清中IL．2、slL一2R的含量变化，探讨加味青蒿鳖甲汤对IL．2、slL．2R的影响及及加味青蒿鳖甲汤诱导DC的机理。方法：将AML．CR骨髓经Ficoll密度梯度离心获得骨髓单个核细胞(BMNC)后，用免疫磁珠阳性选择法提取CD34+细胞，经细胞因子(SCF、TPO、FL、IL．3)体外扩增后，用含10％FCS的

5、RPMll640培养液调整CD34+细胞浓度后加入6孔板中培养9天，2～3天换液1次，以不同浓度中药含药血清与细胞因子(GM．CSF、IL．4、IFN．0【、TNF．0【)、细胞因子组、空白血清组、小牛血清组分别培养；在培养的第0天、第6天和第9天用ELISA法分别检测各组血清中IL．2、slL．2R的含量，并在培养过程中观察细胞的形态、拍照。9天后流式细胞仪检测DC表面免疫分子CD83、CD80、CD86、CDla、HLA．DR的表达。结果：1．DC的形态：倒置显微镜下观察，第3天均可见细胞成簇并形成散在的集落，

6、体积变大，半悬浮生长；第6天多数细胞悬浮，集落增多，细胞呈多形，一部分细胞可见少量短刺突出细胞表面：第7天细胞胞体较前进～步增大，周围短刺较前明显，并且增多；第9天典型的DC已经形成，胞体外周树突变长，分支增多。各中药联合细胞因子组诱导DC形态上比细胞因子组要典型，突起较多、较明显；各中药组之间无明显差别；小牛血清组、空白组则无典型DC细胞形态。2．IL．2的含量比较：各中药联合细胞因子组第9天、6天含量均高于第0天，JWZ组第9天的含量明显高于第6天(P<0．01)，JWG组第9天的含量高于第6天(P<0．05)

7、；在同一时间内，各中药联合细胞因子组IL．2的含量均高于空白组。3．slL．2R的含量比较：各中药联合细胞因子组第9天含量均明显低于第0天、第6天(P

8、中同时促使DC高分泌IL．2，并抑制slL．2R的生成。加味青蒿鳖甲汤促进血清IL．2水平的升高和slL．2R的降低可能是该方促进CD34+细胞向DC转化的机制之一。关键词：加味青蒿鳖甲汤；AML．CR；CD34+；DC；IL．2；slL．2R贵阳中医学院硕士学位论文AbstractObjective：Inthisexperiment．invitromethodstoachievecompleteremissioncriteriainpatientswithacutemyeloidleukemiabonemarro

9、wCD34+cell，respectivelymodifiedpreparationofQingHaoBieJiaSoupcontainingserumgroupculturecontainingserum，observedwithserumonDCdifferentiationandmaturationeffects，andthecontent'schan