藏羚羊血红素氧合酶-1基因编码区的克隆及序列分析

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1、分类号：Q78密级：UDC：610编号：20120320090072009级高校教师在职攻读硕士学位研究生毕业论文藏羚羊血红素氧合酶-1基因编码区的克隆及序列分析CloningandSequencinganalysisofcodingregionofhemeoxygenase-1（HO-1）genefromTibetanantelope（Pantholopshodgsonii）指导教师：格日力教授学生姓名：曹学锋论文类型：理论研究学科专业名称：病理学与病理生理学研究方向：高原医学学院(系、部)：医学院论文起止时间：2010.12—2012.3青海大学医学院

2、2009级高校教师在职攻读硕士学位研究生毕业论文目录中文摘要···················································2英文摘要···················································4前言·······················································6材料与方法（第一章）········································9实验结果（第二章）·························

3、················20讨论（第三章）·············································24结论（第四章）·············································27参考文献··················································28附录······················································31致谢·······································

4、···············32文献综述··················································33攻读学位期间取得的成果····································40学位论文独创性声明········································41学位论文知识产权属声明····································42第1页共43页青海大学医学院2009级高校教师在职攻读硕士学位研究生毕业论文中文摘要藏羚羊血红素氧合酶-1基因编码区的

5、克隆及序列分析藏羚羊（Pantholopshodgsonii）俗称长角羊，偶蹄目、牛科、藏羚属，是青藏高原特有的国家一级保护动物，主要分布在青藏高原以及新疆南部、四川西北隅和甘南的部分地区。常年生活在海拔3500m～5500m高寒草甸、高寒草原和高寒荒漠等低氧环境，尤以4500m～5500m的无人区较常见，具有极强的抗缺氧、耐高寒等适应能力，是研究高原低氧高寒等适应机制最理想的动物模型之一。血红素氧合酶-1（hemeoxygenase-1，HO-1）即热休克蛋白32(heatshockprotein,HSP32),又称诱导型HO-1,是一种拮抗氧化应激的抗

6、氧化酶,分子量为32kD,广泛分布于全身组织,尤其是单核细胞、巨噬细胞系统的微粒体中多有分布,以肝脏、肾、心、肺、脾脏、骨髓和网状内皮细胞中活性最高。人HO-1大约有288个氨基酸，HO-1基因定位于人染色体22q12,HO-1基因含有4个内含子,5个外显子。HO-1能被多种氧化应激的损伤因素所诱导,如热休克、高寒、血红素、过氧化氢、高氧、内毒素、低氧、多种细胞因子、重金属离子和一氧化氮(NO)、紫外线辐射等,这些诱导因素的共同特征是导致氧化应激发生。HO-1是近些年倍受重视的细胞内源性抗氧化酶,本质上属于应激蛋白,能在各种氧化应激状态下出现适应性表达,发

7、挥抗自由基等多种细胞保护作用。HO-1抗氧化作用源于其对促氧化的游离血红素的降解和催化生成具有强大抗氧化能力的产物胆红素,胆红素具有非特异性清除多种自由基的效应。藏羚羊能在高海拔低氧高寒地区生存，奔跑时速可以高达60Km/hr，且可以连续奔跑70-100Km，说明其从基因分子水平有高度的保护和适应机制,而血红素氧合酶-1（HO-1）具有广泛的细胞保护和抗氧化效应。为了揭示藏羚羊血红素氧合酶-1（HO-1）在细胞保护和抗氧化方面的作用及对低氧高寒适应的生物学机制，我们从藏羚羊肝脏组织克隆了血红素氧合酶-1基因并测序，并对其序列作了分析。从藏羚羊肝脏组织中提取

8、总RNA,用RT-PCR的方法对藏羚羊HO-1基因部分序列进行克隆