肥胖与非肥胖男性内脏及皮下脂肪差异蛋白质组学研究

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1、学校代码:学号:10023200401085肥胖与非肥胖男性内脏及皮下脂肪差异蛋白质组学研究学生姓名:指导教师:完成日期:周姝含北京协和医学院临床医学专业2004级史轶蘩(教授)潘慧(副教授)朱慧娟(副教授)北京协和医学院临床学院北京协和医学院内分泌科2012年6月目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.31引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.42材料与方法⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.62.1研究材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..62.2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..82.3研究流程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.133实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143.1研究对象一般资料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..143.2蛋白质浓度测定及SDS—PAGE⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143.3LC.MS/MS⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..164讨论⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯385结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.446展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.457参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.468附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.49综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67缩略词表Abbreviations缩略语英文全称中文全称SDSSodiumDodecylSul

4、fate十二烷基磺酸钠PAGEPolyacrylamideGelElectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳2DETwoDimensionalElectrophoresis二维电泳KDKilodalton千道尔顿MWMolecularWeight分子量plIsoelectricPoint等电点MSMassSpectrometry质谱Lc.Ms/MsLiquidchrOmatographytandemMass液相色谱串联质谱LC.MS/MS液相色谱串联质谱SpectrometyBMIBodyMassIndex体重指数DTTDithiothrei

5、tol二硫苏糖醇IAAIodacetamide碘乙酰胺NH4HC03AmmoniumBicarbonate碳酸氢铵CON2H4Urea尿素DTEDithioerythritol二硫赤鲜糖醇TrisTrihydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷MES2一N.Morpholinoethanesulfonicacid2一(N-吗啡啉)乙磺酸EDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙酸ACNAcetonitrile乙腈TFATrifluoroaceticacid三氟乙酸ALTAlaninetr

6、ansaminase丙氨酸氨基转移酶ASTAspartatetransaminase天冬氨酸氨基转移酶BUNBloodureanitrogen血尿素氮CrCreatine血肌酐FBGFastbloodglucose空腹血糖中文摘要目的:肥胖症发病率近年在发展中国家上升迅速,肥胖与2型糖尿病、心脑血管疾病、血脂紊乱等多种代谢性疾病关系密切,已成为重要的公共卫生问题。越来越多的研究发现机体内脏脂肪组织和皮下脂肪组织的基因表达水平、代谢特点等并不相同。其中内脏脂肪组织,尤其是大网膜脂肪组织,被认为在肥胖相关疾病中起重要作用,但有关蛋白质组相关研究结果有

7、限。本研究通过研究男性内脏脂肪组织与皮下脂肪组织蛋白组,初步探索脂肪组织与肥胖及其相关疾病的关系。方法:本研究以肥胖(BMI>30Kg/m2)和非肥胖男性(BMI<30Kg/m2)为研究对象,收集内脏脂肪组织和皮下脂肪组织,提取蛋白、酶切后采用LC—MS/MS对蛋白分离鉴定。结果:本研究共鉴定出4组蛋白质组表达谱结果:肥胖组内脏脂肪组、对照组内脏脂肪组、肥胖组皮下脂肪组、对照组皮下脂肪组。(1)对比肥胖组与对照组蛋白质组表达谱结果:内脏脂肪共鉴定出差异蛋白80种,其中肥胖组表达下调的蛋白43种,8种蛋白为对照组特有;肥胖组表达上调的蛋白37种,9

8、种蛋白为肥胖组特有。皮下脂肪鉴定出差异蛋白64种,其中肥胖组表达下调的蛋白22种,4种蛋白为对照组特有;肥胖组表达上调的蛋白42种,8种

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