白桦酯酸对人cik细胞杀伤胃癌sgc-7901细胞的影响及机制研究

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1、徐州医学院硕士学位论文白桦酯酸对人CIK细胞杀伤胃癌SGC--7901细胞的影响及机制研究姓名：王美梅申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：张南征2012-03徐州医学院硕士学位论文白桦酯酸对人ClK细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及机制研究中文摘要目的研究白桦酯酸(Betulinicacid，BetA)作用前后人CIK细胞对胃癌SGC．7901细胞杀伤活性的变化并初步探讨其机制。方法分离健康者外周血单个核细胞(PBMC)，体外经多种细胞因子诱导为CIK细胞，用不同浓度白桦酯酸作用于CIK细胞，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测白桦酯酸对CIK细

2、胞生长的影响；流式细胞术(FCM)检测白桦酯酸作用前后CIK细胞PFP、GraB及CDl07a的表达；乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测白桦酯酸对CIK细胞杀伤胃癌SGC．7901细胞的影响；Western．blot检测白桦酯酸作用前后CIK细胞细胞外信号调节激酶(ERKl／2)蛋白及接头蛋白SLP．76、LAT的表达变化。结果白桦酯酸浓度在O．08～10p咖1范围时，CIK细胞的增殖率较对照组显著提高，差异具有统计学意义(P<0．05)；当浓度为0．08～5ug／m1的白桦酯酸作用CIK细胞48h后，其PFP、GraB及CDl07a的表达均有所上调；浓

3、度0．3～1．25ug／ml的白桦酯酸作用48h后，对胃癌细胞SGC．7901的杀伤活性显著高于对照组，差异具有统计学意义(P

4、；胃癌细胞；CIK细胞2一垒型垦兰堕堡主茎堡垒查一———————————————————————————————————————————————————一一TheinfluenceoncytotoxicityofhumanCIKcellsinducedbybetulinicacidtogastriccancercelllinesSGC—·7901andtheh“itsrnechanisresearcOlitsmecnanis；mnAbstractObjeetiveToobservetheeffectofbetulinicacid(BetA)onthe

5、growthofhumancytokineinducedkiller(CIK)cellsandthekillingactivityofCIKcellsonthegastriccancercellsinvitrobeforeandafterinducedbybetulinicacid，exploreitsmechanism．Me}thodsPeripheralbloodmononuclearcell(PBMC)wereseparatedformthehealthyandwereinducedwithvariousofcytokinetobecomeCI

6、Kcellsinvitro．CIKcellswerecollectedonthetenthdayandwereinducedwithbetulinicacidindifferentconcentrations，followedby48hours，thecolorimetricmethylthiazolyltetrazolium(MTT)methodassaytheproliferationrateofhumanCIKcells；flowcytometry(FCM)wastodetecttheexpressionchangesofperforin，gr

7、anzymeBandCDl07aofhumanCIKcellsbeforeandafterbetulinicacid-induced；lactatedehydrogenase(LDH)releaseassaywereusedtomeasuretheinfluenceoncytotoxicactivityofCIKcellsinducedbybetulinicacidagainstgastriccancercelllineSGC-7901invitro；Westernblottingassaywasusedtomeasuretheextracellul

8、arsignal—regulatedkinasel／2(ERKl／2)，andadapterproteins