氟离子注入钛表面改性对成骨细胞和牙龈卟啉单胞菌相互作用的影响

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1、氟离子注入钛表面改性对成骨细胞和牙龈卟啉单胞菌相互作用的影响计：学位论文：36页表格：3个插图：7幅朱丽颖指导教师：马国武教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：口腔临床医学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明IIYIIllllllllllllll／ll／lllllllllllllllltl228292㈣9lY本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特另O,Di：l以标注和致谢的地方外，论

2、文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：冬阻签字日期：鲨年三月盟日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOQ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(二

3、)材料与方法⋯⋯⋯QOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODOO⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODO0"O⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(六)参考文献⋯⋯⋯OODO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··j⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28四、附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯30五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯oDoaoa⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36氟离子注入钛改性材料对成骨细胞和牙龈卟啉单胞茵相互作用的影响硕士生姓名：指导教师：专业名称：朱丽颖马国武教授口腔临床医学摘要目的：本实验应用氟离子注入技术，综合评价氟离子注入纯钛前后表面体征以及氟离子注入前后纯钛材料对成骨细胞和牙龈卟啉单胞菌相互作用的影响，建立细菌、细胞与材料界面间的接触关系，模拟种植体周围炎的模型，综合评价氟离子注入前后材料表面的成骨细胞和牙龈卟啉单胞菌相互作用的影响，从而为探索出一种既具有抗菌性又具有生物相容性的新型种植材料提供了有利的条件

5、。方法：一、氟离子注入纯钛表面制备及微观表征1、材料的制备将钛片an：i：成厚度为lmm、直径为30mm的钛片，表面砂纸打磨、机器抛光至镜面后分为实验组(氟离子注入的钛片)和对照组(纯钛片)两组。离子注入源为四氟化碳，氟离子注入设备由哈尔滨工业大学提供的自行研发的第三代等离子注入设备。2、物理特性分析材料表面化学元素的分析：PHI．5700ESCA型X线光的电子能谱分析系统。二、氟离子注入钛表面改性对成骨细胞和牙龈卟啉单胞菌相互作用的影响1、细胞增值实验用DMEM培养基将P．g悬液稀释成108CFU／ml，用于置换培养板中的细胞培养液，分别培

6、养3小时，6小时，9小时，12小时，24小时。将MG．63制成5×103cells／ml的细胞悬液，接种于96孔板中，复种2孔，培养基用CCK．8溶液置换(CCK一8：培养基=1：10)，培养4h后，用酶标仪测定各孔在450nm波长处的吸光度值。2、碱性磷酸酶活性实验用DMEM培养基将P．g悬液稀释成10SCFU／ml，用于置换培养板中的细胞培养液，分别培养3小时，6小时，9小时，12小时，24小时后弃去培养液，O．01mol／LPBS漂洗细胞3次，用Ttrion．X100细胞裂解液裂解细胞，】2000r／rain4。离心15min，各取30

7、uL裂解细胞与100uL碱性磷酸酶反应底物混匀，水浴l5min后放入96孔板再加l50ul显色剂，在酶标仪405nm波长下读取ALP活性的OD值，取平均值．其数值大小可以反映ALP活性的高低．3、实时定量PCR实验实验分为无菌组和有菌组，无菌组分别将成骨细胞接种到氟离子注入钛片和纯钛片过夜，再继续培养6小时后进行实时定量PCR检测；有菌组将成骨细胞接种到氟离子注入钛片和纯钛片培养过夜后，用DMEM培养基将P．g悬液稀释成108CFU／ml置换原培养基，继续培养6小时后，进行实时定量PCR检测。结果：一、氟离子注入钛表面改性材料的微观表征XPS

8、宽程扫描分析显示，氟离子注入前出现氧、碳、钛三种元素；氟离子注入后出现氧、碳、钛、氟四种元素，比未进行氟离子注入的纯钛表面多了一个氟元素。二、氟离子注入钛表面改性对