拜城盐山放线菌物种多样性及其抗植物病原真菌菌株的筛选

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1、分类号：Q939．96密级：灸旁学号：08910004．象驻衰喜太挚高校教师在职攻读硕士学位论文拜城盐山放线菌物种多样性及病原真菌菌株的筛选其抗植物ScreeningofBaichengyanshanactinomycetesspeciesdiversityanditsresistancetoplantPathogenicfungistrain研究生姓名导师姓名及职称学位门类级别专业名称研究方向所在学院章建新教授农学硕士作物栽培学与耕作学极端放线茵资源利用研究农学院新疆·乌鲁木齐二。一二年十一月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文

2、中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：功少年／／月7日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容

3、。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：舭时间：矽p年刀月刀日别币签名．磊砂纠时间：矽陟年，／月7日本文是“973"计划前期研究专项“新疆典型盐环境放线菌资源及其防病农用抗生素研究’’(2010CBl34505)；国家自然科学基金项目“塔里木盆地典型盐环境放线菌多样性及其聚酮类功能基因的挖掘"(项目编号：31060001)的部分研究成果课题主持人：张利莉教授(塔里木大学)拜城盐山放线菌物种多样性及其抗植物病原真菌菌株的筛选摘要本研究以拜城盐山土样为研究对象，采用免培养和可培养相结合的方法来分析拜城盐山放线菌的物种多样性，并获得盐山环境中的放线菌物种资源。以免培养所得到的放线菌多样

4、性结果为基础来指导放线菌的分离培养，有针对性的获取新疆拜城盐山放线菌物种资源。以农业生产上危害较为严重的植物病原菌为靶标，筛选拮抗放线菌菌株，为极端环境下放线菌的开发利用提供技术支撑和菌种支持。得到如下结果：(1)利用PCR-RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism，限制性片段长度多态性)免培养方法分析盐山样品中放线菌多样性。通过构建克隆文库，共得到216个放线菌克隆，分布于放线菌纲的两个亚纲中，即放线菌亚纲171个克隆，占总克隆数的79．2％；酸微菌亚纲45个克隆，占总克隆数的20．8％，所获得的16SrDNA基因序列与GenBank中已知的微球

5、菌序列的最大相似度小于92％，为新的酸微菌亚纲的放线菌类群。样品中的优势放线菌为放线菌亚纲棒杆菌亚目诺卡氏菌科的红球菌属，占到克隆总数的51．9％。文库中的序列有24．5％的16SrDNA基因序列与已有效发表放线菌的序列相似性低于97％，代表着放线菌新的种类，部分序列形成了几个独立的进化分支，可能代表着具有更高分类地位的放线菌类群。(2)采用9种培养基以6种盐度梯度分离培养盐山样品中的放线菌。通过纯化培养，共获得35株放线菌。经过初步鉴定，这35株放线菌分布于放线菌目的4个亚目中。链孢囊菌亚目的菌株数量最多，其中拟诺卡氏菌属有17株；链霉菌亚目中的链霉菌属有4株，链单孢菌属有4株；放线多孢菌

6、亚目中的放线多孢菌属有3株，盐放线孢菌属有3株；假诺卡氏菌亚目中的糖单孢菌属有4株。35株放线菌中的4株为潜在的放线菌新物种。(3)对从盐山样品中分离到的35株放线菌进行拮抗棉花枯萎、棉花黄萎以及辣椒疫霉病原菌的筛选，其中的3株放线菌具有对这三种植物病原真菌具有很好的拮抗活性。关键词：拜城盐山；放线菌多样性；免培养法；可培养法；拮抗放线菌筛选ScreeningofBaichengyanshanactinomycetesspeciesdiversityanditsresistancetoplantPathogenicfungistrainAbstractmSPapertotheactinomy

7、cetesseparationidentificationinBaichengyanshan．thefreeculturemethod．Separatedandcultivated．basedon16Sr【)NAgenesequencesystemdevelopmentanalysisinthebaichengyanshanthediversityofactinomycetes．SOastogettheyan