多供体造血干细胞移植术后的嵌合率定量检测

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1、苏州大学硕士学位论文多供体造血干细胞移植术后的嵌合率定量检测姓名：冯宇锋申请学位级别：硕士专业：免疫学指导教师：缪竞诚2012-10多供体造血干细胞移植术后的嵌合率定量检测中文摘要目的：中文摘要在多供体造血干细胞移植术后，运用荧光标记的多重PCR扩增短串联重复序列(STR．PCR)的方法，建立检测供体细胞嵌合率的计算模型并简化计算方法。方法：以2010年2月～2012年6月在苏州大学附属第一医院接受异基因造血干细胞移植的血液系统疾病患者为研究对象，采用STR—PCR结合毛细管电泳的方法，检测移植后供体细胞嵌合率。1．选取

2、单供体或双供体移植术后，混合嵌合状态下的外周血或骨髓样本，比较STR位点中同一个体来源的等位基因的双峰面积。2．对常见嵌合状态下STR各峰面积进行赋值，比较嵌合率准确值与近似值之间的差异。结果：1．混合嵌合状态下，同一个体来源的等位基因的双峰面积和高度是近似的，可以互相替代。2．基于“替代”的设想，构建常见嵌合状态的计算模型并简化计算方法。3．对构建的计算模型中各等位基因的峰面积进行赋值，得到的嵌合率准确值和近似值在可接受的计量系统自身误差范围内(△<20％)是基本没有差异的。结论：1．混合嵌合状态下，来自于同一个体的等

3、位基因在STR位点的图谱上表现出来的峰具有近似的峰高和峰面积。以此为基础，提出将非共享峰替代共享峰面积的设想，用作计算近似嵌合率。2．基于“替代”的设想，确定了有效位点的选择标准，构建了常见嵌合状态的计算模型，并简化了计算方法。发现多供体移植后，混合嵌合状态下，受体位点I±奎塑至多供体造血干细胞移植术后的嵌合率定量检测—————————————————————————————=_二二二二==：：=====：：：：=：：==：二竺三．竺竺的选择比供体位点更为重要，能更加有效的简化计算步骤，并能更准确的得到供体细胞嵌合率的结

4、果。关键词：异基因造血干细胞移植；脐血移植；多供体；嵌合率：共享峰II作者：冯宇锋指导教mJili．缪竞诚教授Quantitativemonitoringmulti．．donorhematopoieticObjective：“hi‘followingolCmerismfollowingnlstemcelltransplantationAbstractToestablishamodelfordetectingthedonorchimerismratefollowingthemulti．donorhematopoietics

5、temcelltransplantations，usingfluorescentlylabeledmultiplexPCRofshorttandemrepeats(STR-PCR)andsimplifiedcalculationmethodatlast．Methods：FromFebruary2010toJune2012，patientswithhematologicdiseasereceivinghematopoieticstemcelltransplantationincludingsingle·donorandmu

6、lti—donorwereselectedinthisstudyandthedonorcellchimerismrateweredetected，usingSTR-PCRcombinedwithcapillaryelectrophoresis．1．Selectedperipheralbloodorbonemarrowsamplesfollowingsingle-donorormulti．donortransplantations，inthemixedchimerism，comparedpeakareasofalleles

7、comingfromthesamesources．2．Inthemixedchimerism，comparedthereferencechimerismvalueandapproximatechimerismvalue，usingthehypotheticalpeakareas．Results：1．Inthesituationofmixedchimerism，thepeaksofthesisterallelescomingfromthesameindividualwereconfirmedtohavetheapproxi

8、matearea·2．Basedonmeideaof”alternative”，establishedamodelfordetectingthedonorchimerismrate，andsimplifyingthearithmeticcalculationsfordouble-donorchimerism·3．In