垂盆草对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤保护作用的实验研究

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时间:2019-02-16

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1、温州医学院硕士学位论文垂盆草对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤保护作用的实验研究姓名:张涛申请学位级别:硕士专业:外科学指导教师:周蒙滔2012-05-24温州医学院硕士学位论文垂盆草对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤保护作用的实验研究目的:急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)是临床上常见的急症,是多种病因导致胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应。其病变程度轻重不一,大多数以胰腺水肿为主,病情常呈自限性,预后良好。少数重者,胰腺出血坏死,常继发感染、腹膜炎、休克及多器官功能衰竭等多种并发症,称为重症急性胰腺炎(severeacutepancreatiti

2、s,SAP),因其发病急、发展快、病情凶险、病死率高,仍是目前临床上一大难题。SAP所引起的肝损伤是SAP严重的并发症之一,不但可以加重胰腺炎病情,而且直接影响SAP预后,甚至最终发展为肝功能衰竭,导致患者死亡。本文旨在通过检测SAP大鼠肝脏组织中NF—KB蛋白表达,IL一6、IL10和TNF—Q水平及肝脏组织病理学观察,研究垂盆草(SedumsarmentosumBunge,SsB)对SAP大鼠肝损伤的保护作用及作用机制,从而为垂盆草应用于SAP及其并发症的治疗提供一定的动物实验依据。方法:42只健康雄性Sprague—Dawley大鼠,体重200—2509,随机分为假手术组(shamo

3、perationgroup,SO组)、重症急性胰腺炎组(severeacutepancreatitis,SAP组)和垂盆草治疗组(SedumsarmentosumBungetreatment,SsB组),每组分为12、24h两个时间点组,每个时间点组内7只。本实验采用经十二指肠乳头逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠(O.Iml/1009)的方法制备大鼠SAP模型。造模后SsB组皮下注射垂盆草(100mg/lOOg),SO组与SAP组则予等量生理盐水皮下注射,12h时间点组术后给予一次药物,24h时间点组于术后12h再次皮下注射药物一次。各组分别于造模后12、24h处死大鼠,取肝脏组织分装,分别予

4、4%多聚甲醛溶液固定、一80。C冰箱冻存,采用以下检测:①石蜡切片常规HE染色,进行肝脏组织镜下观察;②免疫组化检测肝脏组织中核转录因子一KB(NF—KB)的表达;③酶联免疫吸附试验(ELISA)方温州医学院硕士学位论文法检测肝脏组织匀浆液中白细胞介素一6(IL一6)、白细胞介素一10(工L一10)和肿瘤坏死因子一Q(TNF-Q)表达,并观察垂盆草对上述各项指标的影响。结果:1.组织病理观察:①大体观察:S0组肝脏外观形态无明显改变。SAP组腹腔内见大量混浊血性腹水,胃肠道明显扩张,大网膜、肠系膜可见皂化斑,胰腺肿胀、可见有出血坏死灶;肝脏表面弥漫性出血并可见坏死灶,体积增大,包膜紧张。S

5、sB组见少量腹水,胰腺肿胀,出血坏死情况较SAP组明显改善;肝脏体积增大,色泽灰暗,较SAP组为轻。②镜下观察:S0组正常肝脏表现;SAP组可见肝细胞气球样变,肝细胞界限不清,少量局造性坏死,肝窦扩张充血,汇管区内炎性细胞浸润;SsB组肝脏改变则较SAP组有明显改善。2.肝脏组织NF—KB蛋白表达的变化:S0组肝组织中几乎无阳性表达。SAP组表达明显升高,与S0组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与SAP组相比,SsB组NF—KB表达在12h、24h时低于同时段的SAP组,两者比较有统计学意义(P

6、L-6、IL一10及TNF-Q水平均显著高于S0组(P<0.05),SsB组IL一6和TNF—Q水平显著低于SAP组(P<0.05),而IL-IO水平显著高于SAP组(P

7、炎:垂盆草;ELISA:免疫组化:肝损伤温州医学院硕士学位论文AnExperimentalStudyofProtectiveEffectofSedumSarmentosumBungonLiverInjuryinRatwithbedumarmentosUBunge0n1VerRatW1tObjective:beVereACUteranCreat1tlS^■一-●-●AbstractTostudytheprotectivee

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