wnt经典信号通路在慢性氟中毒大鼠骨骼损伤中作用机制的研究

《wnt经典信号通路在慢性氟中毒大鼠骨骼损伤中作用机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、《中国图书资料分类法》单位代码：10660分类号：R599.9学号：S090042贵阳医学院2012届硕士学位论文Wnt经典信号通路在慢性氟中毒大鼠骨骼损伤中作用机制的研究研究生：陈锡山导师：于燕妮教授易韦教授年级：2009级专业：病理学与病理生理学2012年5月26日贵阳医学院2012届硕士研究生论文目录摘要············································2前言············································4材料与方法··············

2、·························6结果·············································18讨论·············································23结论·············································27参考文献·········································28英文摘要·········································31

3、致谢·············································33英文缩略语·······································34论文原创性声明····································35附：综述··········································361贵阳医学院2012届硕士研究生论文Wnt经典信号通路在慢性氟中毒大鼠骨骼损伤中作用机制的研究专业：病理学与病理生理学姓名:陈锡山导师:于燕妮教授易韦教授摘要

4、目的通过研究慢性氟中毒大鼠成骨细胞中Wnt3a和β-catenin蛋白及其mRNA表达水平的变化，初步探讨Wnt经典信号通路在氟骨症发生机制中的作用。方法利用饮水加入不同浓度（5mg/L和50mg/L）氟化钠（NaF）进行大鼠染氟实验，同时设置正常组，实验期8个月。实验中观察大鼠氟斑牙的发生情况，使用电极选择法测定尿氟及骨氟含量。确定慢性氟中毒模型的复制成功。HE（Hematoxylin-eosin，苏木素-伊红）染色观察股骨骨组织的形态学变化；ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay,酶联免

5、疫吸附法）检测大鼠血清中BALP含量（BoneAlkalinePhosphatase，骨碱性磷酸酶）和TRACP-5b（tartrate-resistantacidphosphataseform5b,抗酒石酸酸性磷酸酶）含量；IHC（Immunohistochemistry,免疫组织化学）方法检测股骨成骨细胞Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平；ISH（insituhybridization，原位杂交）方法检测股骨成骨细胞Wnt3a和β-cateninmRNA表达水平。结果1、染氟大鼠出现不同程度氟斑牙损害，以高氟组最为严

6、重，对照组无氟斑牙发生，各组间差异有统计学意义（P<0.05）；尿氟及骨氟含量随染氟浓度的增加而逐渐增加；表明慢性氟中毒大鼠模型复制成功。2、HE结果显示慢性氟中毒大鼠骨密度增加，与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05），表现为骨皮质增厚，骨小梁增宽、排列紧密。骨密度随着氟浓度升高而增加。3、ELISA检测结果显示在氟中毒组BALP升高，与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与低氟组比较，高氟组含量升高，差异有统计学意义（P<0.05）。与正常组比较，低氟组TRACP-5b含量增加显著，差异有统计学意义（P<0.

7、05）；高氟组与对照组比较无统计学意义（P>0.05），但与低氟组比较，TRACP-5b含量降低，差异有统计学意义（P<0.05）。2贵阳医学院2012届硕士研究生论文4、免疫组化实验结果显示，氟中毒组Wnt3a蛋白和β-catenin蛋白表达均升高，与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；高氟组Wnt3a蛋白质和β-catenin蛋白表达高于低氟组表达，差异有统计学意义（P<0.05）；统计Wnt3a蛋白和β-catenin蛋白表达相关性，Wnt3a蛋白随着β-catenin蛋白两者的表达正相关性（R=0.856，P<

8、0.05）。5、原位杂交法实验结果显示，氟中毒组Wnt3amRNA和β-cateninmRNA表达均升高，与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；高氟组Wnt3amRNA和β-cateninmRNA表达高于低氟组表达，差异无统计学意义（P>0.05）。结