肺癌患者血清p53抗体的诊断意义

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1、肺癌患者血清p53抗体的诊断意义潘洁茹(广东省佛山市第一人民医院检验科广东佛山528000)【摘要】目的探讨血清p53抗体对肺癌患者诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测60例正常健康人和120例肺癌患者血清p53抗体。结果肺癌患者血清p53抗体水平和阳性率均明显高于正常人(PV0.05)。结论检测血清P53抗体水平有助于肺部恶性疾病的诊断。【关键词】肺肿瘤血清p53抗体酶联免疫吸附法【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)04-0196-02近年的研究发现，肺癌的发牛、发展是一个多基因参与的复杂过程，其中P53基因结构和功能异常在

2、肺癌的发生、发展过程中起重要作用［1］。分析p53基因变化可采用分子生物学、免疫组化、血清学等多种方法⑵，前两种方法由于操作复杂和繁琐不易在临床推广，而血清学方法具有操作简便、重复性好，不需肿瘤标木等优点，目前越来越受到广泛重视。木研究应用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)法检测120例肺癌患者血清p53抗体水平，并与正常健康人作比较，以探讨检测肺癌患者血清p53抗体的临床意义。1材料与方法1.1检测对象正常组60例，均为木院门诊作健康体检者。男30例，女30例，年龄22〜65岁，平均37.5岁。肺癌组120例，男96例，女24例；年

3、龄22〜75岁，平均57.8岁；所有病例均经临床病理诊断证实。1.2标木的收集真空血清促凝管采集受检者当日空腹静脉血2ml,离心分离血清。当曰未检测血清置于一20°C冰箱保存备测，并与一周内测定。1.3检测方法应用ADL公司Mouse-humanantioncogenep53-17ql3.1ELISA试剂盒及西班牙TRIURUS全自动免疫分析仪，操作严格按说明书进行：⑴洗涤重组P53蛋白或质控蛋白包被的聚苯乙烯微量反应板，将稀释的样木、质控及标准品各lOOul分别加入到相应反应板微孔内,(2)各孔分别加入酶标记溶液50uL,36±20C震荡温育1小吋，⑶洗板机洗涤5次后吹干，加

4、入酶反应底物A、B液各50uL,36±20C避光反应15分钟，加入20uLH2SO4终止酶反应。用酶标仪测定450nm读取各孔吸光度。p53抗体浓度用两个不同参数确定：指数(index)=(样品p53蛋片净吸光值一质控蛋片净吸光值)/(低值阳性质控p53蛋白净吸光值一质控蛋白净吸光值)吸收率(ratio)=(样品p53蛋白净吸光值)/(质控蛋白净吸光值)1.4统计学处理本实验数据采用Excel2007建立数据库，t检验、F检验、χ2检验进行统计分析，采用SPSS13.0系统软件处理。2结果2.1不同组别血清p53抗体指数和吸收率的比较正常人和肺癌患者血清p53抗体指数和

5、吸收率经F检验有显著性差异(P<0.05)(表1)。表1肺癌组与正常组间血清p53抗体指数和吸收率的比较组别数目P53抗体指数吸收率正常人组0.135±0.329600.631±0.190肺癌组1.521±0・7651201.362±0.1522.2术前不同组别血清p53抗体阳性率的比较60例正常人血清p53抗体指数的x-=0.631,s=0.116,吸收率的x-=0.135,s=0.200,以超过x・+1.645s为判断阳性标准，即指数>0.822和吸收率〉0.464,分别判定指数和吸收率阳性，当二者同为阳性，即判定为p53抗体阳性。

6、正常健康人无一例阳性。120例肺癌患者中有65例血清p53抗体阳性，阳性率为54.2%o经χ2检验，肺癌组与正常组间有显著性差异(P<0.01)o3讨论p53基因突变是人类肿瘤最常见的基因改变⑶，约50%〜60%的非小细胞肺癌和80%小细胞肺癌有p53突变[4,5]o突变的结果导致异常的p53蛋白产生，其构象异常使半衰期延长至数小时，从而在细胞内聚积。聚积的突变型P53蛋白作为靶抗原引发机体的自身免疫应答，产生血清p53抗体⑹。国外学者应用ELISA方法在多种肿瘤患者血清中检测到p53抗体。并发现有较好的临床意义。本研究观察到肺癌患者血清P53抗体指数和吸收率均明显高于正常人(PV0

7、.05)。120例肺癌中有65例p53抗体阳性，阳性率为54.2%,而60例正常人无一例阳性者。本研究结果与文献报道结果一致，表明检测肺癌患者血清P53抗体，用于肺部恶性疾病的诊断，具有较好的特异性，这一点在其它恶性肿瘤亦得到了证实[7]。参考文献[1]MinnaJD.Themolecularbiologyoflungcancerpathogenesis.Chest,1993z103(Suppl1):449S