annexin a7过表达与小鼠肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关性

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1、AnnexinA7过表达与小鼠肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关性计:学位论文:37页表格:11个插图:lO幅张雪指导教师:唐建武教授申请学位级别:硕士学位专业名称:病理学与病理生理学论文提交日期:2012年4月论文答辩日期:2012年5月学位授予单位:大连医科大学学位授予日期:2012年6月评阅人:答辩委员会主席:独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同

2、志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:趁望签字日期:丝丝年上月蔓曰目录一、摘要oeooeeeeeoleoeeeeelooooeeeeeoeeoeooeeoeeeeeoeoooooeeoeeeBeaoooteoooeooeeoemo001(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOOOOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)日{J吾”一⋯⋯⋯⋯一”“⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯5(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯·25(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOOOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37AnnexinA

4、7过表达与小鼠肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的相关性硕士研究生:张雪指导教师:唐建武教授专业名称:病理学与病理生理学摘要背景:肝癌是我国最常见的恶性肿瘤,据统计,每年约有11万人死于肝癌,其死亡率在恶性消化系统肿瘤中位列第三,约占全球肝癌死亡数的45%左右,其具有高侵袭、转移早、复发率较高、预后差等的临床病理特征,而转移是其死亡率高的主要原因,研究肿瘤转移的发生机制并探索有效的治疗方法对改善患者预后和降低肝癌死亡率有重大意义。近年来,研究显示膜联蛋白A7(AnnexinA7,Anxa7)的表达水平与前列腺癌和转移性黑色素瘤的发展和预后有关。即AnnexinA7可能参与肿瘤的

5、发生和淋巴道转移的过程。近年来本课题组利用来源于同一亲本细胞,但淋巴道转移能力不同的小鼠肝癌细胞株——-Hca.F和Hca.P,Hca.F细胞淋巴结转移率>70%,为高淋巴道转移细胞.Hca.P细胞淋巴结转移率<30%,为低淋巴道转移细胞,并利用抑制性消减杂交技术、基因芯片技术等发现AnnexinA7在Hca—F细胞中的表达高于Hca-P细胞,证实降低其表达水平可以抑制小鼠肝癌细胞的分裂增殖,促进凋亡,降低小鼠肝癌细胞的迁移能力和侵袭能力。提示AnnexinA7可能是决定Hca.F细胞淋巴道转移潜能的关键基因之一。目的:1.构建PG.CMV.EGFP.Kan/neo.An

6、nexinA7表达载体,稳定转染至Hca.F细胞,获得AnnexinA7基因表达上调的Hca.F细胞株。2.研究AnnexinA7基因表达水平上调后小鼠肝癌细胞株Hca-F细胞在细胞增殖能力、迁移能力、侵袭能力等方面的变化,探讨AnnexinA7基因的过表达对小鼠肝癌细胞生物学行为的影响。方法:构建PG.CMV.EGFP.Kan/neo.A1111exinA7表达载体和PG.CMV—EGFP.Kan/neo一无关序列阴性对照表达载体,转染并筛选培育出PG.CMV.EGFP.Kan/neo.AnnexinA7载体稳定转染的Hca.F细胞株和稳定转染无关序列的阴性对照组Hca

7、.F细胞株,进而上调AnnexinA7在HcmF细胞中的表达,经qRT.PCR和Westemblot检测A彻exinA7在mRNA和蛋白质的表达水平,运用CCK.8试剂盒和Transwell小室比较AnnexinA7上调的Hca.F细胞组和正常Hca.F细胞组的增殖、迁移和侵袭能力。结果:1.重组质粒测序结果与AnnexinA7基因序列进行比对,基因合成得到的序列与AnnexinA7基因序列完全一致,说明AnnexinA7基因的重组质粒构建成功。qRT.PCR检测Hca-F细胞、稳定转染PG—CMV.EGFP.Kan/neo.

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