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时间:2018-12-11
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1、优秀毕业论文大连医科大学硕士学位论文AnnexinA7表达调控对小鼠肝癌淋巴道转移的影响姓名:金艳玲申请学位级别:硕士专业:病理学与病理生理学指导教师:唐建武201006精品参考文献资料优秀毕业论文AnnexinA7表达调控对小鼠肝癌淋巴道转移的影响硕士研究生:金艳玲指导教师:唐建武教授专业名称:病理学与病理生理学摘要目的:肝癌是常见的恶性肿瘤之一,具有高侵袭、转移早、手术或介入治疗后复发率较高、预后较差的临床病理特征。早期发现并防止肝癌转移是改善病人预后的重要手段。因此,明确侵袭转移的发生机制
2、并探索行之有效的治疗方法是研究肝癌的重点,也是临床上面临的严峻挑战。近年来国内外学者对AnnexinA7进行大量的研究,发现其表达异常与乳腺癌、前列腺癌和转移性黑色素瘤的发生发展有关。一些研究也发现AnnexinA7可能涉足肿瘤发生、浸润和转移等过程。因此深入研究AnnexinA7对于淋巴道转移的机制,探索淋巴道转移关键分子机制和通路,并在此基础上发展出有效的干预手段,以及提高恶性肿瘤患者的生存率都有重要意义。材料和方法:以Hca.F、Hea.P、Hea.F.pSileneer、Hca.F.sh
3、RNA、Hea.P-peDNA3.1和Hca—P-AnnexinA7六种细胞为研究对象,将其分别接种到615小鼠足垫制造肿瘤淋巴道转移模型。采用HE染色、免疫组化和WesternBlot等方法,检测AnnexinA7基因上调和下调表达调控后,其淋巴结转移率的变化及其在肿瘤原发灶和转移淋巴结肿瘤细胞中蛋白表达含量情况。‘.结果:1.Hca.F.shRNA细胞组与Hea.F.pSileneer细胞组相比,其淋巴道转移率提高,P=0.018,差异非常显著;Hca.P.AnnexinA7细胞组与Hca—
4、P-peDNA3.1细胞组相比,其淋巴道转移率显著下降,P=0.005,差异非常显著。2.1)AnnexinA7在Hca·F—shgNA细胞组原发灶肿瘤细胞中的表达强度低于Hea-F-pSilenccr细胞组原发灶肿瘤细胞中的表达强度,P=0.000,差异非常显著;而AnnexinA7在Hea.P.AnncxinA7细胞组原发灶肿瘤细胞中的表达强度高于Hca.P.pcDNA3.1细胞组原发灶肿瘤细精品参考文献资料优秀毕业论文胞中的表达强度,P=0.000,差异非常显著。2)AnnexinA7在H
5、ca.F.shRNA细胞组淋巴结转移灶肿瘤细胞中的表达强度高于Hca.F.pSilencer细胞组淋巴结转移灶肿瘤细胞中的表达强度,P=0.002,差异非常显著。3)AnnexinA7在Hca.F.pSilencer细胞组原发灶肿瘤细胞中的表达强度高于淋巴结转移灶肿瘤细胞,P=0.001,差异非常显著。AnnexinA7在Hca.F.shRNA细胞组淋巴结转移灶肿瘤细胞中的表达强度高于原发灶肿瘤细胞,P=0.000,差异非常显著。AnnexinA7在Hca.P.pcDNA3.1细胞组淋巴结转移灶
6、肿瘤细胞中的表达强度高于原发灶肿瘤细胞,P=0.001,差异非常显著。3.AnnexinA7在Hca.F.pSilencer细胞组、Hca.F.shRNA细胞组原发灶肿瘤细胞中主要定位于胞浆,小部分定位于胞膜,在转移淋巴结的肿瘤细胞中几乎只定位于胞浆;而在Hca.P.pcDNA3.1细胞组和Hca.P.AnnexinA7细胞组原发灶肿瘤细胞有小部分定位于胞核,在转移淋巴结的肿瘤细胞中几乎也只定位于胞浆。4.高转移细胞株(Hca.F)中51KD和47KD两个亚型和总蛋白的表达趋势是一致的呈高一低一
7、高表达的趋势;低转移细胞株(Hca.P)中只有.47KD和总蛋白的表达的表达趋势一致,表达逐渐减少。AnnexinA7在F.shRNA28组中总蛋白含量和47KD的表达低于F28组,而5lKD的表达却是F.shRNA28组高于F28组;AnnexinA7在PA728表达可见总蛋白和51KD均高于P28组,而47KD的表达却是低于P28细胞组。结论:1.下调AnnexinA7基因在Hca.F细胞内的表达,提高了Hca.F细胞的体内淋巴结转移率。上调AnnexinA7基因在Hca.P细胞内表达,降低
8、了Hca.P细胞的体内淋巴结转移率。2.AnnexinA7基因上调和下调表达调控后,在肿瘤组织原发灶和淋巴结转移灶肿瘤细胞中其蛋白含量表达有差异,提示AnnexinA7基因可能在肿瘤淋巴道转移过程中发挥作用。3.AnnexinA7在肿瘤细胞主要定位于胞浆,而在高低转移细胞组定位有一定的差异。除胞浆着色外,在高转移细胞组,小部分定位于胞膜;在低转移细胞组,小部分定位于胞核。提示AnnexinA7基因表达变化对肿瘤的发生发展有极为密切的关系。4.高低转移细胞中均表达51KD和47KD两个亚型,且以4
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