bcg对人外周血来源树突状细胞mirna表达谱影响及其初步验证

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1、摘要结核分枝杆菌是典型的胞内寄生菌，主要靶细胞是巨噬细胞，但树突状细胞能显著激活初始型T细胞，启动T细胞免疫应答反应，是细胞免疫反应的重要启动者。MicroRNAs作为一类18—22nt的小分子，其调控作用广泛存在真核生物的各个进程，而且在免疫方面尤为重要，本研究采用miRNA芯片明晰BCG感染前后DCs中miRNA表达谱的变化，以发现可能参与DCs调控结核分枝杆菌感染相关miRNA，并采用RealtimePCR进行初步验证，为阐明DCs抗结核分枝杆菌的特异性miRNA调控机制奠定基础。1、成功分离

2、并培养出健康人外周血来源的树突状细胞，经过BCG感染DCs前后MicroRNA芯片检测，显示miRNA表达谱的差异，上调的有hsa-miR一1270；hsa．miR一147b；hsa-miR-3201；hsa-miR．132：hsa-miR．3611：hsa-miR．155；hsa-miR-1973；hsa-miR．934；hsa-miR一106b*等30个，下调的有hsa-miR一27b；hsa．miR-151-5p；hsa-miR一374c；hsa-miR一425；hsa-miR一125b；hs

3、a-miR．361—5p；hsa-miR一320c；hsaomiR-130a等32个，这些miRNA可能在DCs抗结核分枝杆菌的感染中起着重要的作用。2、成功采用颈环引物捕捉成熟miRNA，并反转录成cDNA，构建了T载体，采用绝对定量对其中的4个miRNA分子进行了RealtimePCR分析，结果显示BCG作用后，树突细胞中miR．155，miR．146a，miR一132表达上调(P

4、键词：结核分枝杆菌，树突状细胞，miRNA，表达谱AbstractMycobacteriumtuberculosisisatypicalintracellularparasites，themaintargetcellsaremacrophages，dendriticcellscansignificantlyactivatenaiveTceilstostarttheT—cellimmuneresponse，whichisanimportantinitiatorofthecellularimmunere

5、sponse．MicroRNAsasaclassof18—22ntsmallmolecules，canregulationofwidespreadeukaryotesprocess，particularlyitplayimportantroleintheimmune．ThisstudyusedMicroRNAmicroarraytoclearmiRNAexpressioninDCsbeforeandaftertheBCGinfection，andmaybedetectinvolvedcontrolM

6、ycobacteriumtuberculosisinfection-associatedmiRNAintheDCs，andusedRealtimePCRforpreliminaryverification，itbasisforthefoundationinordertoclarifythespecificityofmiRNAregulatorymechanismofMycobacteriumtuberculosisinfectionDCs．1．Successfullyisolatedandcultu

7、redhumanperipheralblood-deriveddendriticcells，beforeandafterBCGinfectionofDCs，MicroRNAchipshowthedifferencesinmiRNAexpressionprofiling，，raisedmiRNAIncludeofthehsa-miR-1270；hsa-miR一147b；hsa-miR-3201；hsa-miR一132；hsa—miR-3611；hsa-miR一155；hsa-miR一1973；hsa-

8、miR-934；hsa-miR一106b+，etc．ThedecreaseofmiRNAincludeofhsa-miR-27b；hsa-miR-·151-5p；hsa-miR-374c；hsa-miR-425；hsa-miR··125b；hsaomiR--361·-5p；hsa-miR一320c；hsa-miR一130a,etc．ThismiRNAmayplayanimportantroleintheMycobacteriumtuberculosisinfectio