糖尿病肾病中医证型与白介素-10的相关性研究

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1、糖尿病肾病中医证型与白介素JO的相关性研究方则剑(湖北省黄石市河口卫生院湖北黄石435001)【摘要】目的：探索糖尿病肾病中医证型与白介素J0关系，为糖尿病肾病中医治法提供临尿依据。方法：以证候问卷量化表86例己确诊糖尿病肾病患者划分中医证型，同时取外周血，运用酶联免疫法定量检测白介素40。结果：阴虚燥热证组血白介素J0浓度明显高于其它组，与气阴两虚证组、脾肾气虚证组对比差异无统计学意义(P>O.05),主证中阴阳两虚证最低，与阴虚燥热证组、气阴两虚证组对比差异有统计学意义(P<O.05)o结论：糖尿病肾病的中医木虚证型可能与白介素・10存在一定相关性。【关键词】

2、糖尿病肾病；白介素J0；中医证型【中图分类号1R587.1【文献标识码】B【文章编号11003-5028(2015)5-0157-02糖尿病肾病是糖尿病的常见并发症，糖尿病的主要死亡原因之一。DN是一种由多种因素综合作用而发牛的慢性疾病，可能致病因素包括糖代谢紊乱、肾脏血流动力学改变、免疫细胞因子异常及遗传背景等⑴。木文尝试探索DN患者中医证型与白介素J0的关系，以期为中西医结合治疗DN寻找新的切入点。1资料与方法1.1临床资料：观察组(DN患者):2013年9月至2014年3月在湖北省黄石市中医院门诊及住院己确诊为糖尿病肾病患者。患者分组标准:糖尿病肾病无蛋白尿组(Upro

3、/Ucr<30mg/g)＞糖尿病肾病少量蛋白尿组(30mg/g<Upro/Ucr}300mg/g)＞糖尿病肾病大量蛋白尿组(300mg/g<Upro/Ucr)＞糖尿病肾病肾功能不全组各30例。对照组(健康组):选择同期来上述医院体检的年龄、性别与观察组相兀配的30名健康体检者(所有人员均无心脑血管疾病，无肝、肾疾病，血压、血脂以及心电图均正常)。1.2纳入和排除标准1.2.1纳入标准:2型糖尿病的诊断采用1999年世界卫生组织WHO诊断标准;DN的诊断采用Mogenson标准。符合以上糖尿病诊断标准,DN的诊断分期为III、IV、V期的患者即可纳入研究。1.

4、2.2排除标准:①原发或其它继发肾脏疾病;②其它内分泌疾病;③恶性肿瘤;④自身免疫性疾病;⑤2周内糖尿病各种急性并发症;)2个月内使用过免疫调节药物。符合以上一项者即排除研究2方法2.1中医证候分型:根据《中药新药临床研究指导原则》中糖尿病和慢性肾功能衰竭的中医证候诊断标准，拟定中医证候问卷量化表，将临床症状和症候逐项按无、轻微、明显和严重分别计为024和6分为量表制定统一操作规程，对研究者进行研究方法培训。2.2白介素・10检测2.2.1试剂与仪器：humanlL-10多克隆抗体、浓缩生物素化抗体、浓缩酶结合物；欣搏盛生物科技有限公司生物中心酶联免疫试剂盒；2.2.2方法：

5、确定微孔条需要测试所需的数量，包括标本、空白和标准品的微孔条数量并做复孔；添加相应浓度的100uL标准品；空白反应孔添加lOOuL标准品&标本稀释液；标本的反应孔添加100ul血标本；盖封板胶纸，振动筛振荡，360孵箱孵育90分钟；拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入100uL生物素化抗体工作液到标准和样本反应孔，加入生物素化抗体稀释液到空白的反应孔，盖封板胶纸。盖封板胶纸，振动筛振荡，360孵箱孵育60分钟。拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入100uL浓缩酶工作液到标准和样本反应孔，加入100uL浓缩酶稀释液到空白的反应孔；盖封板胶纸，振动筛振荡，36

6、0孵箱孵育15分钟；拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入lOOuL显色底物液到所有标准和样本反应孔;振动筛振荡,360孵箱孵育15分钟；迅速加入100uL终止液到所有孔阻止酶反应；使用酶标仪进行检测。2.3统计方法：中医证型与血ILJ0相关性分析，两组以上均数比较采用单因素方差分析，通过SPSS18.0统计软件处理，以P<O.05为有显著性差异的标准。3结果3.1所选五组患者血白介素40浓度的均值士标准差数值（如表1）可见发病初期患者血白介素J0浓度持续升高，正常组与DM无蛋白尿组比较有统计学意义（p<0.05）,与其它组（少量蛋白尿组、大量蛋白尿组、肾功能

7、不全组）比较差异无统计学意义（p>0.05）；4讨沦本研究结果显示，ILJ0在健康对照组、糖尿病肾病无蛋白尿组（早期组）比较有统计学意义（p<0.05）,其中糖尿病肾病早期组比健康对照组数值高，说明糖尿病肾病早期的发生与炎性反应相关，此阶段未发生血管并发症时，ILJ0伴随炎性反应而升高，而在以后糖尿病肾病组中，数值虽然较正常健康对照组是升高的，随着病情进展IL-10表达逐步降低，DN大量蛋白尿（糖尿病肾病III期）及DN肾功能衰竭（糖尿病肾病IV期）和健康对照组水平接近，糖尿病肾病早期，IL