神经外科icu病房鲍曼不动杆菌耐药性基因研究分析

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1、神经外科ICU病房鲍曼不动杆菌耐药性基因研究分析马英花，杨桂清，曹银光聊城市人民医院，252000【摘要】目的：调查分析聊城市神经外科ICU病房109株鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶基因型。方法：用K-B法测定临床分离的109株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药性，采用PCR法检测β-内酰胺酶耐药基因型。结果：除IMP外,109株鲍曼不动杆菌对其余13种抗菌药物的耐药率均超过50%,PCR扩增对IMP中介或耐药的53株鲍曼不动杆菌有11株扩增到blaOXA-23,产ESBLs组29株中有5株扩增出blasHv>blaCTX-M-14>blaCTX-M-3,

2、2株出现blaSHV、blaCTX-M-lo结论：聊城市神经外科ICU病房鲍曼不动杆菌多重耐药常见，β・内酰胺酶产牛率高，碳青霉烯酶以blaOXA-23型为主，ESBLs、AmpC酶两种β-内酰胺酶基因的多重PCR阳性率均低。【关键词】鲍曼不动杆菌；β■内酰胺酶；基因型【中图分类号】R446.5【文献标识码】A【文章编号12096-0867(2016)-03-049-02不动杆菌是近年来医院感染中分离率增长非常快的菌种，其中鲍曼不动杆菌最为常见［1］。鲍曼不动杆菌是一类不发酵糖类、氧化酶阴性、没有动力的革兰阴性细菌，是目前引起院内感染的重要的条件致

3、病菌,随着广谱抗牛素的广泛使用及介入性操作的使用，鲍曼不动杆菌在非发酵菌中分离率仅次于铜绿假单胞菌而位居第二，而在不动杆菌属中分离率最高。该菌在医院环境中分布很广且可以长期存活，极易造成危重患者的感染，因此常从被感染患者的血、体液、脓液及呼吸道分泌物等标木中分离出，在非发酵菌中感染仅次于假单胞菌［2］。本研究对2009年1月・2014年6月，109株鲍曼不动杆菌耐药的表型和常见的β-内酰胺酶基因类型进行了检测，现报告如下。1材料与方法1.1菌株来源：2009年1月・2014年6月间共从聊城市人民医院神经外科ICU住院病人送检标本中分离出鲍曼不动杆菌109株，标本类型包

4、括痰液、创面分泌物、血液、导管等，全部菌株均分别使用法国梅里埃VETEC2COMPACT进行细菌鉴定试验。使用的标准菌株为人肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。1.2药敏试验：采用K-B法测定13种抗菌药物的敏感性。本实验采用的方法和判读标准均按照美国CLSI2014的规定进行。1.3AmpC粗提酶液制备与三维试验：参照文献操作[3]1.4基因检测：均为PCR法:β-内酰胺酶基因检测本研究共进行了18种β■内酰胺酶、氨基糖昔类修饰酶基因检测，引物和产物见表X表1靶基因PCR引物序列Note：blaADCgene,wholegeneam

5、plificationsequencingfowardprimer：5’-ATGCGATTTAAAAAAATTTCTTGTC/TTA-3’,reverseprimer：5’-TTATTTCTTTATTGCATTC-AGCACAA/GC-3’.PCR・productisll52bp.2结果我们对聊城市人民医院神经外科ICU病房培养的109株鲍鳗不动杆菌釆用K-B法进行了13种抗菌药物敏感性试验，用PCR检测了β■内酰胺酶耐药基因型，结果如下：2.12009年1月・2014年6月神经外科ICU鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的药

6、敏结果（表2）表2鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率和敏感率（％）2.2ESBLs基因的多重PCR结果为：71株鲍曼不动杆菌对CTX/CAZ均耐药，对该71株菌中的每一株均进行了SHV、CTX-M-3和CTX-M-14基因PCR的电泳分析，结果表明，29株菌中共有5株扩增出条带（该29株菌均来自三维试验产ESBLs组），其中3株表现为大小不等的3条单一条带，分别约150bp、300bp、450bp,分别是blaSHV、blaCTX-M-14>blaCTX-M-3；5株扩增条带中的另外2株出现大小一致的双条带，均约为150bp、300bp大小,考虑同时存在blaSHV、blaC

7、TX-M-1两种基因型（图2）。42株鲍曼不动杆菌（该42株菌均来自三维试验不产生ESBLs组）的PCR扩增电泳结果均没有条带出现。3讨论鲍曼不动杆菌感染的治疗一直是临床上很大的难题，因为鲍曼不动杆菌极易对各种消毒剂和抗菌药物产生耐药性,对重症患者、ICU病房的患者等威胁很大。多重耐药鲍曼不动杆菌、泛耐药鲍曼不动杆菌、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌等的广泛传播更是成了医生和患者的噩梦。鲍曼不动杆菌是医院感染重要的条件致病菌，其环境释放能力强，传播速度快，已成为呼吸道院内感染的主要致病菌，也可引发菌