nf-κb及其调控mirna在宫颈癌移植瘤及癌旁组织中活化和表达

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1、摘要目的：研究宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR一15b，miR．16的表达状况以及NF．v．B信号通路在宫颈癌癌旁组织活化情况，为宫颈癌的早期诊断和治疗提供新思路。方法：采用小鼠宫颈癌U14细胞悬液建立小鼠腹水瘤模型，传3代后将腹水瘤细胞接种于30只昆明小鼠右侧腋窝皮下建立皮下移植瘤模型。待瘤块直径大小为1．5cm×1．5cm时(约15日后)，将其颈椎脱臼处死，取癌组织与距离癌组织2cm以上的癌旁组织，以及正常的脂肪组织，应用实时荧光定量PCR方法检测各标本中miR．15b，miR．16的表达状况，利用免疫组化检NNF．v．B(p65)蛋白在各组织中细胞质和细胞核的表

2、达及定位情况。结果：1．U14细胞悬液接种于雌性昆明小鼠腹腔，2周后腹水瘤模型成功建立，取其腹水瘤细胞建立皮下移植瘤模型，2周后成瘤率100％，移植瘤切片行HE染色，可见宫颈癌细胞浸润皮下脂肪生长，造模成功。2．实时定量检测miR．15b和miR．16在宫颈癌组织及癌旁组织的表达情况，miR．15b在宫颈癌组织中表达为32．21+3．67，明显高于癌旁组织的25．16+1．86和正常组织的1．00(尸<0．05)，癌旁组织也显著高于正常组织(尸

3、0．05)，癌旁组织也显著高于正常组织(尸<0．05)。3．免疫组织化学显示在正常脂肪组织中，NF．rd3(p65)蛋白主要定位于胞浆，而在癌组织与癌旁组织中，NF．v．B(p65)蛋白主要位于胞核。宫颈癌组织中NF．v．B(p65)蛋白的表达显著高于癌旁组织和正常组织(P

4、：宫颈癌；NF．KB；miRNA．15b；miRNA．16AbstractABSTRACTObjective：ToinvestigatetheexpressionofmiR·-15bandmiR·-16aswellasthestatusofNF-心signalinginxenograftedcervicalcanceranditsadjacenttissues，whichwillprovidenewinsightfortheearlydiagnosisandtreatmentofcervicalcancer．Methods：MicecervicalcancerU14cell

5、ssuspensioninjectedinKunmingmiceabdomentoestablishascitestumormodel．Afterthreegeneration，usingascitescellstoestablishtumor-bearingmousemodelinfightarmpitofthirtyKunmingmice．Whenthexenograftsgrownto1．5cmx1．5cm(aboutl5days)．xenograftedcanceranditsadjacenttissues．normalfattissueswerecollected

6、respectively．TheexpressionofmiR一15bandmiR一16weredetectedbyreal—timePCR．TheexpressionandsublocationofNF-KB(p65)Wasanalyzedbyimmunohistochemistrytechnology．Results：1．MicecervicalcancerU14cellssuspensioninjectedinKunmingmiceabdomen，aftertwoweeks，themodleofascitestumoraresuccessful．Thenusingas

7、citescellstoestablishsubcutaneouslytumor-beatingmousemodel．Aftertwoweeks，therateoftumorare100％．HEstainingofthexenograftindicatedthatthemodelissuccessful．2．Real-timePCRanalysisshowedthatthemiR-15blevelsinthecancerare32．21+3．67，whichsignificanthigherthanitsadjac