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1、绿僵菌属4个生防潜力菌株的多基因鉴nr;王峰刘斌农向群鲁红学王广君曹广春刘少张泽华中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室长江大学农学院摘要：传统的绿僵菌分类鉴定以形态特征为主要依据，其局限性使种内仍包含着复杂的类群。DNA分子鉴定使绿僵菌属、种分类更为细化和准确，对其育种、杀虫机理、生态学等的研究非常重要。本文对绿僵菌4个有生防潜力的菌株IPPMO10202.1PPM2029、1M1330189和M200614的5个持家基因即核糖体转录间隔区序列(ITS1-4)、B微管蛋白(beta-tubulin)、RNA聚合酶II大亚基(RPB1)、RNA聚合酶II第二大亚
2、基(RPB2)和翻译延伸因子(EF-la)的同源序列进行了克隆和测序，通过构建系统发育树进行了多基因进化分析。结果表明，4个生防菌株分别位于进化树的3个分支上，鉴定菌株IPPM010202和IPPM2029同属于平沙绿僵菌Metarhiziumpingshaense,1M1330189为蝗绿僵菌M.acridum,M200614属于低温绿僵菌M.frigidum,它们之间亲缘关系很近，5个基因的遗传分化距离只有0.0211036。ITS1-4序列有较高变异频率和变异幅度，分类效率优于其他基因;EF-la序列在鉴别菌株和分析亲缘性上有优势。多基因的系统进化分析能够弥补单基因分析的局限，
3、取得更为准确的鉴定和更为细化的分类结果。关键词：分了鉴定;多基因标识;绿僵菌;系统发育;亲缘性;作者简介：王峰，硕士研究生1:wangfeng0925@yeah.net;作者简介：农向群，研究员，E-mail:xqnong@sina..com0收稿日期：2017-06-22基金：国家自然科学基金(61661136004,31471824)MultigeneIdentificationofFourPotentialBiocontrolStrainsinMetarhiziumGenusWANGFengLIUBinNONGXiangqunLUHongxueWANGGuangjunCAOGu
4、angchunLIUShaofangZHANGZehuaStateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests/InstituteofPlantProtection,ChineseAcademyofAgriculturalSciences;CollegeofAgriculture,YangtzeUniversity;Abstract：TheclassicalidentificationofMetarhiziumspp.isbasedonthemorphologicalcharacteristics,whichusuallyr
5、esuItsincomplexgroupswithinaspecies.DNAmolecularidentificationcanofferamorerefinedandaccurateclassifiedtionofthespeciesinMetcirhiziumgenus,whichisveryimportantforstudiesonbreeding,insecticidemechanismandecologyofthefungus.Here,fourpotentialbiocontrolstrainsofMetarhiziumIPPM010202,IPPM2029,IMI33
6、0189andM200614wereidentifiedbyphylogeneticanalysisoffiveident/ifiedgenes,i.e.,ribosomaltranscribedspacersequences(ITS1-4),beta-tubulin,RNApolymeraseIIfirst,secondsubunit(RPB1andRPB2),andtranslationextensionfactor(EF-1a)•Basedonthephylogenetictreeconstructedfromthefourcandidatestrainsandtwenty-t
7、woreferencestrains,thefourstrainswerelocatedonthreebranchesofthephylogenetictree.ThestrainTPPM010202andIPPM2029belongtoM.pingshaense,IMI330189isidentifiedasM.acridumandM200614,asM.frigidum,aspeciesadaptivctolowtemperature-Theyhave
