优良绿僵菌菌株的筛选及应用性研究

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1、河北农业大学硕士学位论文优良绿僵菌菌株的筛选及应用性研究姓名：马丽娟申请学位级别：硕士专业：农业昆虫与害虫防治指导教师：李静；李瑞军20120529摘要本研究对保定地区土壤中僵菌资源进行了调查研究，利用黄粉虫诱集法获得白僵菌178株，绿僵菌279株僵菌，对分离获得的菌株进行了初步筛选。通过混合毒力测定方法，选出20株具有较高致病力的金龟子绿僵菌菌株。20株菌株死亡率在66．67％"-'100．00％之间，僵虫率在42．22％"-'-'100．00％之间，致死中时在2．64d～5．72d之间。各菌株僵虫率从大到小依次为：[M7．

2、9，M7．(16．18)】>M7．(64．65)>M7一(283—285)>[M7-287，M7-105]>M7—169>[M7—19，M8—249]>M7—119>M7·130>【M7一(58-59)，M7-67，M7—77]>[M7—184，M7一(83—84)]>[M7-43，M7—194】>M7-149>M7．57；，致死中时从小到大依次为：M7．9>M7．(16—18)>M7一(283．285)>M7．287>M7-(64·65)>M7一(58-59)>M7—19>M7—119>M7-67>M7-43>M7—184>

3、M7—130>M7—105>M8—249>M7-77>M7—169>M7—149>M7—57>M7一(83—84)>M7—194；在初筛获得5株菌株的基础上，以M7—9r、M7．(16．18)、M7．(64．65)为研究对象，对美国白蛾、大豆卷叶螟、东亚飞蝗、榆蓝叶甲、斜纹夜蛾、红脊长蝽、小菜蛾等不同龄期的幼虫进行杀虫活性测定，最终确定3株毒力较好的菌株进行抗紫外能力、抗高温能力的测定，比较了它们在多种条件下的性状，并结合毒力测定的结果筛选出一株具有高毒力且性状优良的绿僵菌菌株M7—9。通过采用二次通用旋转组合设计方案，将筛选

4、出的菌株M7．9进行液固双向发酵研究，以产孢量为指标，选取较佳的发酵条件。在95％置信区间产孢量大于9．17x108孢子儋的优化方案为液体培养基发酵时间72．24h~73．68h，固体培养基中水分比例88．24％,-01．14％，麦壳占麦麸的比例16．34％,-16．95％，液体种子液的接种量14．85m1-15．24ml，固体培养基发酵天数7．94如8．06d。为便于实际生产，将优化方案定为液体培养基发酵时间73h，固体培养基中水分比例90％，麦壳占麦麸的比例16．5％，液体种子液的接种量为15ml，固体培养基发酵天数8d。

5、通过二次通用旋转组合设计方案得出的最佳培养条件，对绿僵菌菌株M7．9和M7．(16．18)进行液固双向发酵，后进行田间试验，施用剂量分别为l万、5万、10万亿孢子／亩(处理A，B，C)，农药对照为辛硫磷、毒死蜱和白僵菌颗粒剂。各处理经DPS数据处理系统随机排列，在夏花生种植区进行根施，花生收获期调查。花生品种不同，各菌株的防治效果也不尽相同。总体上，两株金龟子绿僵菌对病虫害的防治均有一定的效果。在花生品种H．1处j里小区，两株金龟子绿僵菌的防治效果甚至优于化学防治。结果表明，本试验对金龟子绿僵菌的筛选、发酵及应用具有理论和实践

6、意义。关键词：金龟子绿僵菌；生物测定；抗逆性；通用旋转设计；液固双相发酵ThescreeningvirulentstrainofMetarhiziumanisopliaeandthestudyofapplicationAuthor：MaLijuanSupeI啊sor：LiJing，LiRuijunMajor：AgricultureinsectandpestcontrolAbs仃actIntllisPaper,resourceofMetarh拓m，，lanisopliaeandBeauveriabassianainthesurr

7、oundingsofBaodingisinvestigatedbyTenebriomoHtor砌玎elarvaetrappingmethod．Allthestrainsisolatedwereusedtoconductapreliminarybioassay．Bymixedmethods，20Metarhiziumanisopliaestrainswereselected．ThemoaaliWofthesestrainswasbetween66．67％to100．00％，andthestiffwormsrateoftheses

8、trainswasbetween42．22％to100．00％．I凡0of20strainswasbetween2．64dto5．72d．ThestiffrankorderoftheMetarhiziumanisopliaeisolatedwas【M7-9，M7-(16．18