基因芯片检测hbv全基因组转染hepg2细胞株早期基因的表达

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时间:2019-02-13

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1、中山大学博士学位论文ExpressionofInitialGenesinHepG2CellLineTransfectedwithFullLengthHBVGenomeStudiedbyGenechipMajor:InternalMedcineDoctor:LiYongweiSupervisor:ProfessorLiGangAbstractBackgoundThereare350millionpeoplesufferingfromHepatitisinfectedbyHepatitisBvirus(HBV)withah

2、ighriskofLivercirrhosis(LC)、HepatocellularCarcinoma(HCC).20-30millionpeopleinChinaarechronichepatitisB(crm).HBVinfectionisaseverehealthprobleminourcountry.Interferon(IFN)andsomenucleoside/tideanaloguesaleeffectivetotreatHBV,butwithlong-termtherapy,highpricesandi

3、ncreasingdrug-resistance.Tostudynewantiviralagentsaledifficultbeingshortageofknowledgeaboutthepathogenesisofthevirus.Thepathogenesisofthevirusisverycomplicatedincludinginnateandadaptimmuneofthehost,andhurtthehostcellsdirectly.AtthebeginningofHBVinvasion,thetissu

4、esandcells—immunesystem—effectors-immuneeffectivecellsofthehostintegratestoacomplicatedsynergismcooperatedwithallkindsofsignals.Inordertostudysuchhugeinformation,highthroughputgenechiptechnologyisveryappreciated.ThereportsaboutHBVstuiedbygenechipwereabouttheinfl

5、uenceofdifferentHBVproteinstothehost,treatmentwithsomedrugsandcomplicationsofhepatitisB.Butbifurcationexistsinmanyresults.Itrequiresfurtherstudysuch“stealth”virus.ThehumangenechipinAffymetrixCompanyistheperfectgenechipatthepresent.V中山大学博士学位论文Objective1Toobserveg

6、enechangesin2952celllinetransfectedwithfulllengthHBVgenometransiently,whichwasequivalentlytheacutephaseofHBVinfectioninhuman.TostudythepathogenesisofHBV.2Tostudyfurthertheimportantsignalingpathyway_tolllikereceptorsignalingandnaturalkillercellmediatedcytotoxicit

7、ysignalinginHBVinfection,andinhibitoryreceptor-KIR,activatereceptor-KLCandlumicanexpressesinsomecelllines,tostudytherelationofHBVandthem.MaterialsThefulllengthHBVgenome--pBlueScript··2952plasmidwasestablishedinourlaboratory,extractedtheplasmid,digestedbyLguIenzy

8、meandpurifiedthefragmentof3.2kilobases,transfectedHepG2cellline,examinedHBVRNAincells,hepatitisBenvelopantigenandhepatitisBsurfaceantigeninsupernatant.Thecells.named2

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