杜仲皮及雄花中次生代谢产物的变化规律研究

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1、河南大学硕士学位论文杜仲皮及雄花中次生代谢产物的变化规律研究姓名：赫锦锦申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：张保国;李钦20100501摘嚣摘要次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。天然药用植物中的次生代谢产物是植物适应、抵御环境的物质基础，也是发挥防病治病作用的物质基础。次生代谢产物，尤其是有效成分，在药用植物中的含量客观地反映了该植物的内在质量。为了科学地衡量天然药用植物质量的优劣，越来越多的研究者开

2、始将其中的次生代谢产物种类以及含量高低作为评价指标。本文在分析总结了杜仲皮以及杜仲雄花中的化学成分、药理作用和用途的基础上，采用HPLC法对不同实验方案下的杜仲皮、杜仲雄花及其加工产品杜仲雄花茶中5种主要次生代谢产物京尼平苷酸(geniposidesacid，GPA)、绿原酸(chlorogenicacid，CA)、京尼平苷(geniposides，GP)、桃叶珊瑚苷(aucubin，AU)、松脂醇二葡萄糖苷[(+)-pinoresinoldi—O．p．D．glucopyranoside，PDG]的含量进行了测定，旨在对杜仲

3、皮和杜仲雄花中几种重要次生代谢物变化规律进行系统的探索研究，这是很有必要的，将为杜仲皮和杜仲雄花资源的综合开发利用和产业化提供必要的数据、翔实的资料。本文的研究取得了以下主要成果：(1)建立了HPLC法测定杜仲雄花以及杜仲雄花茶中GPA、CA、GP的含量。色谱条件是：色谱柱：Diamonsil丌ⅥC18(51am，150mmx4．6mm)；流动相：甲醇．水一冰醋酸(15：85：1．5)；检测波长：237nm；柱温：25℃；流速：1．0m1．min一。在此条件下，能够实现三者与非被测成分基线分离，并且方法学考察均符合要求。并将

4、此法扩展应用于杜仲皮中以上3种成分的含量测定。(2)建立了HPLC测定杜仲雄花以及杜仲雄花茶中AU的含量。色谱条件是：色谱柱：Diamonsil丌ⅥC18(5lam，250mmx4．6mm)；流动相：甲醇一水(6：94)；检测波长：206am；柱温：19℃；流速：1．0mL．minl。在此条件下，能够实现Au与非被测成分基线分离，并且方法学考察均符合要求。河南大学硕‘{：学位论文赫锦锦并将此法扩展应用于杜仲皮中AU的含量测定。(3)以5种成分含量总量为指标，通过正交设计，找出灵宝地区杜仲的最佳施肥方案。含量测定结果表明，所有

5、杜仲雄花中都不含有PDG；由正交试验结果可知，在以GPA和CA为指标的正交分析结果中，实验中设计的因素和水平对结果均没有显著性影响。在以AU和5种成分的总量为指标的正交分析结果中，复合肥对实验结果有显著性影响，最佳施肥方案分别为AlB3C2即每株杜仲施肥量为微肥509、复合肥3009、尿素1009；A383C2即每株杜仲施肥量为微肥1509、复合肥3009、尿素1009。(4)用所建的含量测定方法，结合药典方法对郑州地区不同采收期杜仲雄花中5种次生代谢产物的含量进行了测定。结果表明，杜仲雄花中不含PDG，且不同花期GPA、C

6、A、GP、AU的含量有较大差别。几种成分的变化规律为：随着花期时间的增加，GPA的百分含量为先升后降；CA和AU总体趋势为降低；GP含量较低。20090316杜仲雄花中5种成分总量最高，且烘干后，外观较好，适宜作为杜仲雄花茶的原料。(5)利用所建的含量测定方法，结合药典方法对杜仲雄花茶中5种次生代谢产物的含量进行了测定。结果表明，杜仲雄花茶中不含PDG，含有GPA、CA、GP、AU，且含量分别为1．9051％，0．5150％，O．9725％，0．4373％。说明杜仲雄花的加工产品杜仲雄花茶中含有GPA、CA、GP、AU，是一

7、种具有保健作用的茶叶，具有开发价值。(6)以5种次生代谢产物(GPA、CA、GP、AU、PDG)为指标，考察了商丘地区不同采收期杜仲皮中次生代谢物的含量变化规律。结果表明，商丘地区的杜仲皮，从4月5号到9月5号的生长期内，5种成分的变化为：AU的含量整体趋势是上升的；GP的含量变化呈下降趋势；GPA的含量在1．91％'---"2．34％范围内波动；CA和PDG含量稳定，5种成分的总量在3．077％'--6．338％范围内波动。(7)对商丘地区4种变异类型杜仲皮中5种次生代谢产物的含量进行了含量测定和差异性比较。5种成分在4种

8、树皮类型中的含量分布为光皮型>浅纵裂型>龟裂型>深纵裂型。单个成分的含量变化梯度为：GPA>>AU>CA>GP-≈PDG。摘要(8)对鹤壁地区采集到的新鲜杜仲皮分别经阴干法、发汗法、烘干法干燥处理，对其中5种次生代谢产物的含量进行了测定。结果表明，5种成分总量排序为阴千>发汗芝烘干，其中阴