生物除油剂的实验研究论文

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1、生物除油剂在前处理的应用研究关键词：生物，除油剂，研究作   者：内  容：摘要：从被油污染的土壤中获取菌源，对混合菌种进行富集驯化，研究了富集驯化过程中油的降解率变化。通过正交试验研究了混合茵液的降解能力。结果发现，第一天油的降解率达到77％，随后逐渐减慢。最佳工艺参数为：温度40℃，pH7．5～8．5，接种量60％，Na2Si03．9H205～7g／L，Na3P04-12H205—20g／L，OP一102g／L，摇床转速150r／min。除油试验表明，在电镀前处理中利用微生物除油是可行的。1前言 金属件电镀及涂装前的除油处理是保证镀层及涂层质量的重要手段。

2、目前，除油处理采用的方法主要有喷砂法、燃烧法、溶剂法、电化学法、化学清洗法及其他多功能水剂除油法。其中，化学清洗投资少、效果好、操作容易、管理方便，是目前应用最多的一种除油处理方法。传统化学除油存在的缺点是使用时必须加热，常温下除油效果差，除油效果随着槽液的老化而逐渐变弱，既浪费资源又造成油污、泥渣的二次污染，还存在高泡沫性和高碱性等问题。因此，寻找一种低成本、无污染、安全性好的室温除油剂，对节约能源、降低能耗、保护环境具有深远的意义。本文对除油微生物进行了富集驯化，研究了钢铁表面微生物除油的影响因素，以期获得可在室温条件下使用的低成本、无污染的高效微生物除油

3、剂。2．1菌种来源 自然环境中，能够降解石油成分的微生物多达200种以上。其中，假单胞菌属、棒杆菌属、微球菌属和产碱杆菌属中存在许多高效降解石油成分的细菌菌株。本试验从各种石油污染的环境中采集菌种样品，作为富集驯化的菌源：(1)以威海槐云路五菱汽车修配厂废机油、汽油、柴油污染的土壤为样品1；(2)以威海东方大众汽配厂受油污污染的土壤为样品2；(3)以威海宇成线业有限公司污水排放口的土壤为样品3；(4)以电镀厂废油污染的土壤为样品4。 2．2培养基 牛肉膏蛋白胨培养基用于细菌总数的测定和微生物分离，原油无机盐培养基用于原油降解菌平板数量的测定。原油无机盐培养基(

4、pH=7．2)的成分如下(以质量分数表示)：润滑油0．2‰NaCl0．5‰(NH4)2S040．1％，MgS04·7H200．025％，NaN030．2％，KH2P040．5％，K2HP04·H201．0％，琼脂l．6％。 2．3试剂和仪器 所用石油醚等试剂均为市售分析纯。 恒温振荡器，pH／温度测试笔，紫外可见分光光度计、分析天平和可见分光光度计，离心机。2．4富集驯化处理 各称取1～4号样品200g，分别加入蒸馏水800mL，搅拌30min，静置沉淀，上清液转移到l0L的玻璃瓶中，从而获得多种来源的混合菌种。然后，加入土壤浸提液1L[1L水中加入200g肥

5、沃土壤(提供各种元素)，搅拌，沉淀，获得的上清液为土壤浸提液]，控制温度在35℃、pH8．5，曝气富集驯化数天。混合液曝气驯化ld后测定残油含量，然后定量补充润滑油、无机磷和无机氮等元素，调整混合液中碳、氮、磷的比例，以利于微生物的生长。富集驯化液中C(即7样机油，为驯化液质量分数的l％)、N[即(NH4)2S04]和P(即KH2P04)的质量比约为l00：5：1。除油微生物驯化装置如图l所示。 图1除油微生物富集驯化装置FigurelDeviceforenrichmentanddomesticationofmicrobes 2．5测定指标 石油含量的测定采用

6、紫外分光光度法，混合液中油的提取方法如下：将定量的待测样品移入250mL分液漏斗中，加入质量分数50％的硫酸5mL酸化，按混合液质量的2％加入氯化钠，用20mL石油醚清洗采样器皿，移入分液漏斗，萃取，油层移入100mL容量瓶中。萃取完全后，用石油醚稀释至标线。在选定波长处，用10min石英比色皿、以石油醚为空白试样测量吸光度，根据标准曲线计算出石油的含量。 2．6驯化过程中微生物的变化 驯化的初期和末期，分别利用牛肉膏蛋白胨培养基和原油培养基、采用MPN(MaximumProbableNumber)法测定异养细菌和原油降解菌的数目，在30℃下，分别培养l周和2

7、周，然后统计细菌的数目。利用牛肉膏蛋白胨固体培养基分别对驯化前、后的微生物进行分离，在30℃下培养3d，观察平板分离的菌株，将菌落形态和菌体形态一致的菌落作为纯种予以保留。 2．7正交试验因素水平 在驯化的末期，以驯化液和分离的菌种混合液制作的混合菌液进行正交试验，按L9(34)考察接种量、初始pH、温度和加油量对降解率的影响。正交试验因素水平见表1。在300mL的三角瓶中，按正交表设定装入混合菌液，不足的部分以无机盐培养基补足，液体总体积为100mL。在30℃、150r／min的摇床中培养24h后，利用紫外分光光度法测定残油的含量。 表1正交试验因素水平表T

8、able1Factorsandleve