复方生物黄酮的致突变实验研究论文

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1、复方生物黄酮的致突变实验研究论文.freeles实验、小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验。结果Ames实验,小鼠骨髓细胞微核实验,小鼠精子畸形实验等结果均为阴性,均未见毒性改变。结论复方生物黄酮在服用剂量内未见致突变性。【关键词】复方生物黄酮;Ames实验;小鼠骨髓细胞微核实验;小鼠精子畸形实验【Abstract】Inordertostudythepotentialmutationgenesisofpoundflavine,edAmestests,ratmarroicronucleartestsandratspermdeformationtests.Theresul

2、tsareallnegative.freelutationgenesiseffectsofpoundbio-flavinehavebeendiscoveredinfeedingdosage.【Keyestests;ratmarroicronucleartests;ratspermdeformationtests随着生命科学的不断发展,人们对生物黄酮有了广泛的研究,发现黄酮类化合物具有良好的抗氧化性能[1]和清除自由基的能力[2];具有抗肿瘤作用[3];植物雌激素样作用;减少体内胆固醇的合成,降糖作用[4]和降低血清胆固醇浓度和对心脑血管的保护作用[5];对细胞免疫功能和

3、非特异性免疫功能均有提高作用。生物黄酮的种类众多,其来源不同,所发挥的生物活性也不同。根据传统中医理论以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料,辅以其他辅料制成的复方生物黄酮,可以更好的发挥黄酮的提高免疫作用,尽管这些主要原料均来源于“既食又药”的物质,但是关于复方成分的致突变性研究较少。为了研究复方生物黄酮(圣安泰牌百力康片)可能对人体造成的潜在致突变性,我们对该产品进行了Ames实验、小鼠骨髓微核实验和小鼠精子畸形实验,以期为今后开发利用我国“既食又药”的医药宝库提供科学依据。1材料与方法1.1样品复方生物黄酮的商品名称为圣安泰牌百力康片,由哈尔滨圣安泰生物科技有限公司提供。

4、样品以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料,辅以其他辅料制成,功效成分为总黄酮。1.2材料昆明种小白鼠(批准证号:医动字第09-2-7号),购自黑龙江省肿瘤研究所实验动物中心。TA97a、TA98、TA100和TA102四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。1.3方法1.3.1鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验(Ames实验)TA97a、TA98、TA100和TA102四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。经菌株特性鉴定均符合实验要求。活化系统为PCB-五氯诱导的雄性SO为溶剂,剂量设计分别为5mg/皿、1mg/皿、0.2mg/皿、0.04mg/皿和0.008mg/皿受试

5、物。除上述5个剂量组外,又设未处理对照组、溶剂对照组(DMSO)和阳性对照组[加s-9用2-AF(TA102用1,8-二羟蒽醌),不加s-9用DEXON(TA100用叠氮钠)]。采用平板渗入法进行实验。在保温的顶层培养基中依次加入测试菌株新鲜增菌液0.1ml,混匀;加受试物或对照物0.1ml[需活化时加入10%s-9混合液0.5ml(含s-95μl)],再混匀,迅速倾入底层培养基上,转动平皿使顶层培养基均匀分布在底层上,平放固化,37℃培养48h观察结果。每个剂量平行做了3皿,并重复一次,最后以3皿平均值报告实验结果。1.3.2小鼠骨髓细胞微核实验昆明种小白鼠,体重25

6、~30g,共50只,在本实验室适应环境7天后,随机分成5组,每组10只,雌雄各半。高剂量组剂量为10g/kgbg/kgbl/kgbg/kgbl/kgbes实验)圣安泰牌百力康片二次Ames实验结果见表1和表2。表1圣安泰牌百力康片第一次Ames实验结果(x±s)注:以上结果为3皿回变菌落数的平均值表2圣安泰牌百力康片第二次Ames实验结果(x±s)注:以上结果为3皿回变菌落数的平均值实验结果表明,受检样品对Ames各实验菌株在加与不加活化系统条件下均呈阴性结果,即鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验为突变阴性结果。2.2小鼠骨髓细胞微核实验圣安泰牌百力康片的小鼠骨髓嗜多

7、染红细胞微核实验结果见表3。表3圣安泰牌百力康片小鼠骨髓细胞微核实验结果注:与阴性对照组相比**P0.01对实验结果进行泊松分布检验,结果两个性别小鼠除阳性对照组外,各剂量组微核率与阴性对照组相比均无统计学差异(P0.05),亦无剂量效应关系,说明受试物小鼠骨髓细胞微核实验为阴性结果。此外,各组动物PCE/RBC值经方差分析差异无显著性,说明各组动物均未见到细胞毒性作用。2.3小鼠精子畸形实验圣安泰牌百力康片的小鼠精子畸形实验结果见表4。表4圣安泰牌百力康片对小鼠精子畸形发生率的影响注:与阴性对照组相比**P0.01从表4可见,各组小鼠均

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