探讨复方生物黄酮的致突变实验探究

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时间:2018-10-21

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1、探讨复方生物黄酮的致突变实验探究:王舒然1,谢友祥2,栗新年3【目的为了探究复方生物黄酮(圣安乐牌百力康片)的潜伏致突变性。方法我们对该产品进行了Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验。结果Ames实验,小鼠骨髓细胞微核实验,小鼠精子畸形实验等结果均为阴性,均未见毒性改变。结论复方生物黄酮在服用剂量内未见致突变性。【复方生物黄酮;Ames实验;小鼠骨髓细胞微核实验;小鼠精子畸形实验【AbstractInordertostudythepotentialmutationgenesisofpoundflavine,

2、edAmestests,ratmarroicronucleartestsandratspermdeformationtests.Theresultsareallnegative,notoxicchangeshavebeenobserved.Itisconcludedthatnomutationgenesiseffectsofpoundbio-flavinehavebeendiscoveredinfeedingdosage.【Keyestests;ratmarroicronucleartests;ratspermdeform

3、ationtests随着生命科学的不断发展,人们对生物黄酮有了广泛的探究,发现黄酮类化合物具有良好的抗氧化性能[1]和清除自由基的能力[2];具有抗肿瘤功能[3];植物雌激素样功能;减少体内胆固醇的合成,降糖功能[4]和降低血清胆固醇浓度和对心脑血管的保护功能[5];对细胞免疫功能和非特异性免疫功能均有进步功能。生物黄酮的种类众多,其不同,所发挥的生物活性也不同。根据传统中医理论以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料,辅以其他辅料制成的复方生物黄酮,可以更好的发挥黄酮的进步免疫功能,尽管这些主要原料均于“既食又药”的物质,但是有关

4、复方成分的致突变性探究较少。为了探究复方生物黄酮(圣安乐牌百力康片)可能对人体造成的潜伏致突变性,我们对该产品进行了Ames实验、小鼠骨髓微核实验和小鼠精子畸形实验,以期为今后开发利用我国“既食又药”的医药宝库提供科学依据。1材料和方法1.1样品复方生物黄酮的商品名称为圣安乐牌百力康片,由哈尔滨圣安乐生物科技有限公司提供。样品以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料,辅以其他辅料制成,功效成分为总黄酮。1.2材料昆明种小白鼠(批准证号:医动字第09-2-7号),购自黑龙江省肿瘤探究所实验动物中心。TA97a、TA98、TA100和T

5、A102四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。1.3方法1.3.1鼠伤冷沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验(Ames实验)TA97a、TA98、TA100和TA102 四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。经菌株特性鉴定均符合实验要求。活化系统为PCB-五氯诱导的雄性SO为溶剂,剂量设计分别为5mg/皿、1mg/皿、0.2mg/皿、0.04mg/皿和0.008mg/皿受试物。除上述5个剂量组外,又设未处理对照组、溶剂对照组(DMSO)和阳性对照组[加s-9用2-AF(TA102用1,8-二羟蒽醌),不加s-9用DEXON(

6、TA100用叠氮钠)]。采用平板渗透法进行实验。在保温的顶层培养基中依次加进测试菌株新鲜增菌液0.1ml,混匀;加受试物或对照物0.1ml[需活化时加进10% s-9混合液0.5ml(含s-9 5μl)],再混匀,迅速倾进底层培养基上,转动平皿使顶层培养基均匀分布在底层上,平放固化,37℃培养48h观察结果。每个剂量平行做了3皿,并重复一次,最后以3皿均匀值报告实验结果。1.3.2小鼠骨髓细胞微核实验昆明种小白鼠,体重25~30g,共50只,在本实验室适应环境7天后,随机分成5组,每组10只,雌雄各半。高剂量组剂量为10g

7、/kgbg/kgbl/kgbg/kgbl/kgbes实验)圣安乐牌百力康片二次Ames实验结果见表1和表2。表1圣安乐牌百力康片第一次Ames实验结果(x±s)注:以上结果为3皿回变菌落数的均匀值表2圣安乐牌百力康片第二次Ames实验结果(x±s)注:以上结果为3皿回变菌落数的均匀值实验结果表明,受检样品对Ames各实验菌株在加和不加活化系统条件下均呈阴性结果,即鼠伤冷沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验为突变阴性结果。2.2小鼠骨髓细胞微核实验圣安乐牌百力康片的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验结果见表3。表3圣安乐牌百力康片小鼠骨

8、髓细胞微核实验结果注:和阴性对照组相比**P<0.01对实验结果进行泊松分布检验,结果两个性别小鼠除阳性对照组外,各剂量组微核率和阴性对照组相比均无统计学差异(P>0.05),亦无剂量效应关系,说明受试物小鼠骨髓细胞微核实验为阴性结果。此外,各组动物PCE/RBC值经方差分析差异无明显性,说

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