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1、（实验题目）开题报告姓名：学院（系、所）：学科专业：导师姓名：开题时间：论文题目中文垂吊矮牵牛再生体系的建立英文Theestablishmentofpetunia'sregenerationsystem论文工作计划简述（开题报告内容）1、本论文课题国内外概况和文献综述：矮牵牛,又名碧冬茄、灵芝牡丹,属茄科矮牵牛属的多年生草本植物.矮牵牛花大而色彩丰富,是装饰花坛、街道的理想花卉,广泛地应用于城市及园林绿化,是世界上最普及,销售量最大的花卉之一[1].近年来矮牵牛在组织培养方面的研究发展很快,现将国内外研究概况分述如下
2、。1.外植体的选择根据植物细胞全能性，理论上任何活组织在适宜的条件下都能发育成完整的植株。但是，在不同生长状况下、发育阶段、生长环境和不同部位的外植体存在一定的生理生化差异，因此选择不同的外植体课影响组织培养的形态发生。分别以叶片、茎尖、茎段、种子、花蕾、花药等作外植体获得再生植株[3-8],但从分化结果来看,茎尖作外植体最好,幼芽分化所需时间短，分化出来的幼芽健壮；其次为茎段，叶片不但产生愈伤组织少，而且产生幼苗所需时间长。在茎尖和茎段试验中，前者无论在生长势或分化率方面都优于后者.由于茎尖数量有限，而叶片培养时间
3、长，因此以茎段（包括茎尖）作为外植体是矮牵牛组培的最佳选择。2.培养基和培养条件的选择在基本培养基的选择上，主要用MS和1/2MS,其中MS主要用来培养愈伤组织及继代增殖,1/2MS主要用于生根培养.也有用NH培养基[6]和1/4MS培养基[9]对矮牵牛进行组培的.针对不同的要求，可以改变基本培养基中的营养成分及其含量。目前为止,大部分组织培养研究者都用6-BA作为主要激素[4,6,10-11],至于使用量,不同的品种、不同的材料和不同的研究者得到了不同的结论.大部分研究者用BA或6-BA或NAA组合来诱导愈伤组织的
4、产生，而且取得了良好的效果。一般BA在1.0-3.2mg/L之间，NAA在0.1-0.2mg/L之间都能获得大量的愈伤组织，最常用的是BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。也有用6-BA与IBA组合取得较好效果的。培养条件的选择上，目前普遍使用的条件为：PH值5.8，光照10-12h，温度20-28度，光照强度1000-2000lx。3.组培苗移栽技术组培苗移栽一般经过三个步骤：首先，当根长至1cm以上，苗高约4-5cm时在自然条件下打开瓶口开始炼苗，炼苗时间约2-3d或7-8d，然后把苗取出，用温水洗干净根部粘
5、附的培养基，移栽至消过毒的无水基质中，适当遮阴并控制环境温度：10-20d后即可移栽大田或上盆。虽然矮牵牛组织培养已经初步建立了快繁体系,为市场幼苗的需求做出了一定贡献,尚有许多问题值得继续研究.如取材污染率高,组织培养适应期长,工厂化生产成本高等问题制约了矮牵牛组培苗工业化生产。2、本论文课题的理论和实际应用意义：基础理论：1）植物细胞全能性2）细胞分化、脱分化与再分化3）器官发生和胚状体发生实际意义：垂吊矮牵牛大面积栽培具有地被效果，景观瑰丽、悦目，具有很好的市场价值。植物组织培养以其繁殖系数大、繁殖周期短、有利
6、保持亲本性状、成本较低、可周年进行生产等优点,为在较短时间内大量生产花卉植物,满足市场需求提供了可能.应用组织培养技术对矮牵牛进行快速无性繁殖,不仅可以保持其优良性状,使花色纯化,在短期内生产出大量整齐、均匀的健壮种苗,还可以进行周年生产,满足市场需求.3、论文的基本内容、结构框架以及要突破的难点：一、仪器及用品：试剂瓶、电子天平、烧杯、量筒、移液管、玻璃棒、容量瓶、培养皿、PH计、记号笔、高压灭菌锅、超净台二、配置培养基（1）MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L（2）MS+6-BA1mg/L+NAA0
7、.1mg/L（3）MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L（4）壮苗培养基：MS（5）生根培养基：MS+IBA0.5mg/L上述培养基均为100ML固体培养基，2.5%蔗糖，0.85%琼脂，PH5.8三、材料与方法1.取材、消毒与接种取垂吊矮牵牛的幼嫩叶片及带顶芽的茎段，用自来水冲洗干净，再用无菌水冲洗2-3遍，在超净工作台上用75%酒精浸泡30S，再用10%次氯酸钠溶液浸泡9min，用无菌水冲洗3次，用消毒滤纸吸干表面水分，将幼嫩叶片切成0.5*0.5左右大小，与带顶芽的茎段一起分别接种于（1）-（3）号
8、培养基中培养，光照10-12h，温度20-28度，光照强度1400-1600lx2.快速繁殖将已分化出芽的愈伤组织分割切小，转接入（1）号培养基中，可以获得大量的丛生芽。3.生根与移栽将带有大量丛生芽的愈伤组织转入不含激素的MS培养基中，丛生芽不再增殖，而是起到壮苗的作用，以利生根。当试管苗长到2cm左右时，切下转入生根培养基中。将生根的苗打开
