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1、第27卷第2期渤海大学学报(自然科学版)Vol.27No.22006年6月JournalofBohaiUniversity(NaturalScienceEdition)Jun.2006青椒中还原型维生素C含量的测定1211马占玲,马占彪,夏云生,陈阳(1.渤海大学化学化工学院,辽宁锦州121013;2.锦州石化公司,辽宁锦州121001)摘要:主要介绍了钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。并对最大吸收波长和最佳显色条件进行了探究,实验结果是在波长839nm处有强吸收,维生素c含量在0.0
2、04-0.024mgömL范围内呈线性关系,方法的变异系数小于2.51%,回收率为97.2%。该方法简单、快速、准确,用此法测得市售青椒样品中的还原型维生素C的含量为0.2390mgög。关键词:分光光度法;维生素C;青椒中图分类号:O65文献标识码:A文章编号:167320569(2006)0220111203[1]维生素C是维持人体正常生理代谢不可缺少的一类有机化合物。维生素C在人体内参与氨基酸[2]和神经传递、胶原蛋白合成,具有降低毛细血管的通透性,刺激凝血功能、增加对感染的抵抗作用等。人体缺少维生素
3、C会引起多种疾病,如坏血病就是人体缺乏维生素C引起的疾病。然而人体所需的维生素C大多数由新鲜的蔬菜供给,新鲜的青椒中维生素C的含量很高。因此,测定包括青椒在内的新鲜蔬菜中维生素C的含量是营养分析的重要内容。[3][4][5]还原型维生素C的测定方法很多,有荧光分光光度计法,过氧化物酶法,2,6-二氯靛酚法等。由于它较易被空气中的氧所氧化,上述方法存在着各种各样的缺陷。本实验选择钼蓝比色分光光度法,因为磷钼酸铵经还原剂维生素C还原后,可以生成亮蓝色的络合物,通过分光比色可以测定青椒中[6]还原维生素C。本法快
4、速、准确、灵敏度高。1实验部分1.1仪器与实验材料紫外-可见分光光度计(UV-1600,日本岛津);6%的钼酸铵溶液:准确称取钼酸铵30.0000g,加适量蒸馏水溶解后定容至500mL;草酸-EDTA溶液:准确称取含结晶水的草酸6.5000g,EDTA0.0600g,充分溶解定容至1000mL;偏磷酸-醋酸溶液:溶解20g片状偏磷酸于40mL醋酸中,稀释至500mL,用滤纸过滤,取滤液备用;标准Vc溶液:准确称取Vc0.0500g;用上述配好的草酸-EDTA溶液定容于100mL的容量瓶中,使标准液浓度达到0
5、.5mgömL;6%的硫酸溶液。1.2实验方法准确称取一定量的市售青椒,加入草酸-EDTA溶液,用搅碎机捣碎后移入250mL容量瓶中,定容,过滤,滤液即为待测样品的提取液。吸取上述青椒的提取液1mL于25mL的容量瓶中,加入9.00mL草酸-EDTA溶液1.00mL偏磷酸-醋酸溶液和3.00mL的硫酸,最后再加入3.00mL钼酸铵,显色收稿日期:2006203208.作者简介:马占玲(19702),女,讲师,从事分析化学教学科研工作.©1994-2008ChinaAcademicJournalElectro
6、nicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net112渤海大学学报(自然科学版)第27卷后,以蒸馏水为参比测其吸光度。2结果与讨论2.1最大吸收波长的确定取一定量的Vc0.5mgömL标准溶液,采用1.2所述的方法进行显色后,在波长600nm-1100nm范围内用UV-1600紫外可见分光光度计进行波长扫描,结果见图1。由图1可见钼蓝的络合物在839nm处有最大吸收值,本实验选择839nm为测定波长。2.2钼酸铵用量的影响图1钼蓝络合物的吸收曲
7、线固定硫酸和Vc标准溶液的用量,改变钼酸铵的用量,测其吸度。结果见图2。由图2可见随着钼酸铵用量的增大,吸光度也随之增大,在3.00mL左右吸光度达到最大值,本法选用3.00mL钼酸铵。图2钼酸铵用量对吸光度影响的曲线图3硫酸用量对吸光度影响的曲线2.3酸度的影响其他条件固定,改变硫酸的用量,测其吸光度。以硫酸的用量为横坐标,吸光度为纵坐标,做曲线,结果见图3。由图3可见硫酸的体积在4.00mL以内,吸光度比较稳定,但大于4.00mL后随之减小,超过5.00mL后吸光度骤然下降。所以本实验硫酸的体积选用3.
8、00mL.2.4显色时间的确定吸取1.00mL标准溶液Vc于25mL容量瓶中,在上述最佳实验条件下进行显色后,在不同的显色条件下测其吸光度,结果表明该体系在草酸-EDTA介质中于室温下13min后反应达到稳定,本实验选择室温下显色时间为13min。2.5标准曲线的确定分别吸取0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mL的标准Vc(0.5mgömL)溶液于25mL的容量瓶中,分别加入草酸-EDTA