中国部分地区不同人群血清中人细小病毒感染状况的分析

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1、温州医学院硕士学位论文目录～中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第一部分：巢式PCR检测人细小病毒(B19、HBoV、PARV4／5)方法的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．材料····⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯·102．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1l3．结果·-⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．144．讨论⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯17小结⋯⋯⋯·⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯一”⋯⋯．．⋯·19第二部分：中国西南及东南地区不同人群血清样本中人细小病毒感染的检测与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201．材料⋯·⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯·202．方法⋯·⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·⋯⋯·⋯·213．结果⋯⋯·⋯⋯⋯⋯··⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯234．讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯·34参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35附录⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯·49生国部分地区丕回厶登鱼渲生厶细丛∑痘妻感染丛况的盆板中文摘要目的分别建立检测人细小病毒B19、人博卡病毒(HBoV)及人细小病毒4／5型(PARV4／5)感染的巢式PCR方法，优化评价后应用于检测中国西南及东南地区不同人群血清样本中的人细小病毒感染，并对感染情况进行流行病学统计分析，

4、以探讨其感染与乙肝疾病的相关性，为上述人细小病毒感染相关疾病的诊治与防控提供科学依据与手段。方法1．巢式PCR检测方法的建立应用构建的标准品质粒(B19、HBoV及PARV4／5)作为PCR模板，分析检测方法的灵敏性；以常见的其它DNA病毒核酸作为PCR模板，分析检测方法的特异性。优化PCR反应体系及条件，分别建立检测人细小病毒B19、HBoV及PARV4／5的巢式PCR方法，三种巢式PCR方法特异性好，检测灵敏度均可达每个反应10个拷贝。2．应用已建立的巢式PCR方法检测中国不同地区人警I血清标本中的人细小病毒收集中国西南及东南地区的乙肝患者、健康成人及健康

5、儿童血清标本，采用病毒核酸提取试剂盒提取病毒DNA，应用已建立的巢式PCR方法检测B19、HBoV及PARV4／5，检测结果应用琼脂糖凝胶电泳法鉴定，阳性样本进行PCR产物回收、测序，结果与GenBank中各病毒的参比株、流行株序列比对，确定检测结果为目的核酸DNA。3．检测结果分析方法不同地区三种病毒的检出率、病毒感染人群的年龄、性别差异等统计学分析方法采用SPSSl7．0、GraphPadPrism5软件。两组间阳性率比较采用四格表资料的卡方检验，多组间阳性率比较采用RXC表资料的卡方检验，P

6、情况382例西南地区(包括西藏125例、四川169例、云南52例、贵州36例)乙肝患者血清标本中，三种人细小病毒检出率依次为B19(3．9％)、HBoV(O．8％)、PARV4／5(3．7％)。其中四个省份乙肝患者血清中三种病毒检出率比较，西藏地区PARV4／5阳性率(9．6％)高于四川(0．6％)、云南(1．9％)、贵州(0％)三个省份，而四个省份中B19及HBoV检出率无明显的统计学差异。温州医学院硕士学位论文四川地区的184份健康成人对照血清标本中，三种人细小病毒检出率依次为B19(4．3％)、HBoV(3．3％)、PARV4／5(3．8％)。与上述的四

7、川地区169份成人乙肝患者比较，差异无统计学意义。同样，与四川地区的175份健康儿童血清标本中检出率B19(9．1％)、HBoV(4．6％)、PARV4／5(4．0％)相比较，差异也无统计学意义。西南地区收集的血清样本中，三种人细小病毒感染在性别、年龄分布上差异均无统计学意义。在乙肝患者中，乙肝携带者组(HBsAg+HBeAg。)与慢性乙肝患者组(HBsAg+HBeAg+)三种细小病毒检出率相比较，差异也无统计学意义。2．中国东南地区人细小病毒感染情况江苏地区收集的95份成人肝病患者(乙肝患者7l份)血清标本中，三种人细小病毒检出率依次为B19(2．1％)、H

8、BoV(9．5％)、删4／5(0％)。