我国不同人群输血传播病毒感染调查

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1、我国不同人群输血传播病毒感染调查【摘要】　目的　了解不同人群输血传播病毒(TTV)的感染状况。方法　采用套式PCR法检测血清标本中TTVDNA，并对其中1株TTV的部分基因序列进行了测定。结果　不同人群TTVDNA阳性率分别为：正常体检人群%，献血员%，吸毒者%，血液透析病人%，妓女%，慢性丙型肝炎病人%，非甲～庚型肝炎0/11。结论　TTV在各类人群中均有较高的感染率。Detectionoftransfusiontransmittedvirus(TTV)indifferentpopulationsofChina　　【Abstract】　Objective　Toinvestigate

2、theprevalenceoftransfusiontransmittedvirus(TTV)indifferentpopulationsofChina.Methods　TTVDNAwasdetectedinseracollectedfromdifferentpopulationsbynestedPCR.PartialgeneofaTTVisolatewasdirectlysequenced.Results　TheprevalencesofTTVinvariouspopulationswereasfollows:%(31/301)ingeneralpopulationwhenrecE

3、ivingphysicalcheckup;%(14/32)inblooddonors;%(5/32)inintravenousdrugaddicts;%(6/11)inhemodialysispatients;5%(13/32)inprostitutes;5%(4/16)inpatientswithchronichepatitisC.Noneofthe11patientswithnonA-GhepatitiswasdetectedTTVDNA.Conclusion　HighprevalenceofTTVinfectionwasfoundindifferentpopulationsof

4、China.　　【Keywords】　Transfusiontransmittedvirus(TTV)　　Polymerase;chainreaction(PCR)　　NonA-Ehepatitisvirus　　椐国内外报道，在急性散发性病毒性肝炎中约10%～20%为非甲～戊型肝炎，其中能检测到庚型肝炎病毒(HGV)者仅占2%～20%［1，2］，且HGV的致病性尚有争议，提示存在新型肝炎病毒的可能性。1997年底，日本学者［3］应用代表性差异分析法(RepresentativeDifferentiation)从1名输血后非甲～戊型肝炎病人中分离到1种新病毒，称为输血传播病毒(TTV)

5、。据报道［4］，该病毒感染与血清丙氨酸转氨酶(ALT)异常有关，且在各型肝炎病人中均有较高的感染率。为了解我国人群TTV感染状况，我们应用套式聚合酶链反应法(nPCR)，对不同地区不同人群进行了TTVDNA检测，并对其中1株TTVDNA部分基因序列进行了测定。现将结果报告如下。　　对象与方法　　一、研究对象：献血员、血液透析患者、吸毒者、妓女的血清标本采自深圳、安徽、云南、青岛；常规体检人群、慢性丙型肝炎病人以及非甲～庚型肝炎患者血清标本采自北京。所有血清标本均直接送到北京医科大学微生物学系，置－20℃下保存备检。　　二、检测方法：酶联免疫法(EIA)检测甲～庚型肝炎病毒的血清学指标

6、；套式逆转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测HGVRNA。TTVDNA检测参照日本报道的TTV序列引物，采用套式PCR法(nPCR)，外引物为P1：5′-gcagcagcatatggatatgt-3′，P2：5′-tgactgtgctaaagcctcta-3′；内引物为P3：5′-catacacatgaatgccaggc-3′，P4：5′-gtacttcttgctggt　　gaaat-3′。TTVDNA提取采用SDS-蛋白酶K裂解法。第一轮和第二轮的PCR循环参数为94℃，30秒；55℃，30秒；72℃，50秒，终末延伸5分钟，两轮均为30个循环。扩增产物经溴化乙锭染色，2%琼脂

7、糖凝胶电泳，然后在紫外灯下观察鉴定。每次PCR均设阴性、阳性和空白对照。　　三、PCR产物序列测定：扩增产物经%低熔点琼脂糖凝胶电泳分离，切下目的DNA条带，用原平公司纯化试剂盒进行回收纯化，采用双脱氧链末端终止法直接测序，测序试剂盒购自Promega公司，测序仪为Bio-Rad公司产品。　　结　果　　一、不同人群TTVDNA的检出情况：由表1可见，TTVDNA阳性率以妓女最高，以下依次为血液透析病人、献血员、慢性丙型肝炎病人、静脉吸毒者和常规体检人群，1