沿面空气等离子体对hacat细胞因子mrna表达及分泌的影响

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1、2015年10月1004第29卷第10期CHINJDEＲMVENEＲEOLOct2015，Vol．29，No．10沿面空气等离子体对HaCaT细胞因子mＲNA表达及分泌的影响1，21，22，312－4钟世玉，董颖颖，刘定新，肖生祥，孔刚玉［摘要］目的探讨等离子体对HaCaT细胞活性、细胞因子表达的影响及作用机制，为其在皮肤创伤愈合的应用提供理论依据。方法CCK-8法测定不同时间等离子体处理对HaCaT细胞活性的影响，流式细胞术检测处理后细胞内活性氧水平改变，并与有NAC存在条件下的改变进行比较;酶标仪检测处理介质PBS中H2O2浓度;采用ELISA及ＲealtimePCＲ方法分析等离子体处

2、理后HaCaT生成细胞因子在蛋白和mＲNA水平的改变。结果沿面空气等离子体对HaCaT细胞具有细胞毒性，呈剂量-时间依赖性。等离子体处理可升高细胞内ＲOS水平，NAC能够明显抑制等离子体处理引起的HaCaT细胞活性下降及细胞内ＲOS水平的增加。与对照组相比，等离子体照射可在不同程度上引起细胞因子IL-1βmＲNA水平的增加，可明显增加IL-6、IL-8、VEGF蛋白及mＲNA的水平。结论空气沿面等离子可通过提高细胞内ＲOS水平发挥细胞毒性作用，其一定程度上的促炎作用及促进生长因子的分泌作用可能在创伤愈合治疗中具有重要意义。［关键词］低温等离子体;角质形成细胞;细胞内活性氧;细胞因子;创伤愈

3、合;等离子体医学［中图分类号］Ｒ751［文献标识码］A［文章编号］1001－7089(2015)10－1004－05［DOI］10.13735/j.cjdv.1001-7089.201503063EffectofSurfaceAirPlasmaonthemＲNAexpressionandsecretionofcytokinesinHaCaTcells1，21，22，312－4ZHONGShi-yu，DONGYing-ying，LIUDing-xin，XIAOSheng-xiang，KONGMichaelG(1．HospitalofDermatology，SecondAffiliatedHo

4、spitalofXi'anJiaotongUniversity，Xi'an710004，China;2．CenterofPlasmaBiomedicine，StateKeyLaboratoryofElectricalInsulationandPowerEquipment，Xi'anJiaotongUniversity，Xi'an710054，China;3．SchoolofElectricalEngineering，Xi'anJiaotongUniversity，Xi'an710049，China;4．CenterforBioelec-trics，OldDominionUniversity

5、，Virginia，23508，USA)［Correspondingauthor］DONGYing-ying，E－mail:dyingying97@163．com;KONGGang-yu，E－mail:mglin5g@gmail．com［Abstract］ObjectiveToinvestigatetheeffectsandmechanismofplasmatreatmentoncellviabilityandcytokinesex-pressionofHaCaTcellsandtoprovidetheoreticalbasisforitsapplicationinwoundhealing

6、．MethodsTheviabilityofHaCaTcellsexposedtoplasmafor0～3minwasmeasuredbyCCK8assayat4h、24hand48h，respectively．Flowcytometrywasusedtodetecttheintracellularreactiveoxygenspecies(ＲOS)levelandcomparedtheresultswiththatinthepresenceofNAC．H2O2concentrationwasanalyzedbymicroplateread-er．ByELISAandＲealtimePCＲ

7、analysis，thechangesofcytokinesgeneratedbyplasma－treatedHaCaTcellswereobservedinbothproteinandmＲNAlevels．ＲesultsSurfaceairplasmahadcytotoxicityeffectonHaCaTcellswithadoseandtimedependencepattern．Plasmatreatmentcou