microrna21对肾缺血再灌注损伤调控作用及其机制地研究

《microrna21对肾缺血再灌注损伤调控作用及其机制地研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容

2、编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日I万方数据摘要摘要目的：探索microRNA-21在肾缺血再灌注损伤中作用机制,以期找到防治肾缺血再灌注损伤microRNA分子靶标。方法：采用微型血管夹,同时夹闭雄性BALB/C小鼠双侧肾蒂构建实验所需

3、的肾缺血再灌注损伤模型，参照前期实验的结果和本次试验的目的将小鼠分为Pre-miR-21+IRI组（阻断肾蒂血管45分钟，再灌注24h，于术前24小时和6小时分别按200ng/kg腹腔注射mir-21agomir）、PBS+IRI组（阻断肾蒂血管45分钟，再灌注24h于术前24小时和6小时分别腹腔注射等体积的PBS）、Pre-miR-21+shame组（仅打开腹腔不阻断肾蒂血管，于术前24小时和6小时分别按200ng/kg腹腔注射mir-21agomir）、PBS+shame组（仅打开腹腔不阻断肾蒂血管，于术前24小时和6小时分别腹腔注射等体积PBS），（n≥5）。四组小鼠缺血再灌注

4、损伤后，收集小鼠血液检测血清肌酐、尿素氮判断肾功能。断颈法处死小鼠，从小鼠背部取一手术切口获取双侧模型肾脏。一侧肾脏行HE染色，光学显微镜下观察模型肾病理组织变化，另一侧肾脏检测模型肾中microRNA-21，PDCD4、PTEN基因的mRNA和caspase-3蛋白的表达。结果：（1）Pre-miR-21+IRI、PBS+IRI组、Pre-miR-21+shame组和PBS+shame组组小鼠存活率分别为87%、75%、100%、100%。Pre-miR-21+IRI组中血清肌酐、尿素氮和肾组织病理评分明显低于PBS+IRI组，但上述两组均高于PBS+shame组和Pre-miR-

5、21+shame（P＜0.05）；PBS+shame组与Pre-miR-21+shame组肾组织病理评分和血清肌酐、尿素氮无明显差异(P＞0.05)。（2）四组小鼠中miR-21的表达存在显著差异，从高到低的排列顺序为Pre-miR-21+IRI、Pre-miR-21+shame组、PBS+IRI组、PBS+shame组(P＜0.05)；Pre-miR-21+IRI组中靶基因PDCD4、PTEN的mRNA表达量低于PBS+IRI组（P＜0.05）；PBS+IRI组中靶基因PDCD4、PTEN的mRNA表达量低于PBS+shame组（P＜0.05）；PBS+shame组与Pre-miR

6、-21+shame组两组之间靶基因PDCD4、PTEN的mRNA表达量无明显差异(P＞0.05)。II万方数据摘要（3）、Pre-miR-21+IRI组中cleavedcaspase-3表达明显低于PBS+IRI组（P＜0.05），PBS+IRI组中cleavedcaspase-3高于PBS+shame组和Pre-miR-21+shame组（P＜0.05），差异均有统计学意义。各组中未经激活的pro-caspase-3无明显差异，P＞0.05无统计学意义。结论：（1）成功构建了雄性BALB/c小鼠肾脏中mir-21过表达模型和肾缺血再灌注损伤模型；（2）mir-21能对其靶基因PDC

7、D4和PTEN进行负向调控；（3）在肾缺血再灌注损伤的环境中mir-21能通过对其靶基因PDCD4和PTEN的负向调控，抑制肾缺血再灌注损伤所造成凋亡，从而对肾脏起到一定的保护作用。关键词：肾缺血再灌注损伤；microRNA-21；microRNA-21干扰；PDCD4；PTEN；Caspase-3III万方数据AbstractABSTRACTObjective:DetectivetheregulationeffectandmechanismofMicro