同种异体去细胞外周神经支架和细胞外atp诱导联合移植实验的研究

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1、同种异体去细胞外周神经支架与细胞外ATP诱导联合移植的实验研究中文摘要目的：制备去细胞同种异体神经支架并利用其对神经轴突生长的引导作用，联合细胞外ATP对神经轴突生长的诱导作用和延缓失神经支配骨骼肌萎缩作用，修复大鼠坐骨神经10咖缺损，研究该联合方法修复神经缺损的效果，为临床应用提供理论依据。方法：取材大鼠的双侧坐骨神经，采用TritonX—100与脱氧胆酸钠序贯脱细胞处理、降低其免疫原性，制备成仅有细胞外组织的同种异体神经支架；将SD大鼠64只，随机分4组，每组16只；分别是实验组(GroupA)、自体神经移植组(Gr

2、oupB)、空白组(GroupC)、正常组(GroupD)，前三组做成右侧坐骨神经缺损模型后分别如下处理：A组：用脱细胞异体神经桥接坐骨神经缺损，术后右侧腓肠肌注射ATP；B组：用自体坐骨神经原位桥接坐骨神经缺损；C组：做成动物模型后缝合皮肤。术后3个月、6个月做足印实验，计算坐骨神经功能指数(SFI)、电生理检测计算坐骨神经传导速度(NCV)、甲苯氨蓝染色检查，计算神经轴突平均面积和密度、透射电镜观察再生神经超微细结构、测定肌湿重、乙酰胆碱酯酶(AchE)染色观察运动终板(MEP)形态变化。结果：大体观察：手术的三组大

3、鼠术后均出现不同程度的右后足失神经性营养不良改变，以C组明显，A组和B组相似。术后三个月和六个月，A组和B组有部分功能恢复，且两组6个月时恢复效果好于3个月，但仍差于D组；C组于3个月和6个月均无可视性功能恢复。A组与B组再生神经外观与正常神经组织相似；C组无神经或其它组织相连。坐骨神经功能指数与腓肠肌湿重：不论是术后3个月还是6个月，A、B组间差别无统计学意义，均好于C组而差于D组，且6个月时好于3个月；A组再生神经有髓神经纤维轴突的密度不及B组，与D组间差别无统计学意义；A组有髓神经纤维轴突的面积大于B组，小于D组；

4、3个月时B组坐骨神经传导速度(NCV)大于A组，小于D组；6个月时A、B组差别无统计学意义，但均小于D组；空白对照组无神经再生证据。结论：1、去细胞同种异体神经支架可以引导神经轴突的再生，不引起明显的排斥反应：2、ATP能在一定程度上延缓骨骼肌萎缩的过程；3、修复周围神经缺损宜采用联遵竖医堂院亟±堂位j佥玄虫塞地至合方法；综合考虑，去细胞同种异体周围神经支架引导与细胞外ATP诱导联合移植可能成为修复神经缺损的备选方案。关键词：去细胞神经支架神经缺损三磷酸腺苷肌肉萎缩遵望医堂院亟±堂位i金塞墓塞趟至Experimental

5、studyonratsciaticnervedefectrepairedwithacellularallograftcombinedwithextracellularATPAbstractobiective：Toinvestigatethecomprehensivetherapeuticeffectofacellularallograficombined晰thextracelhlarATPinrepairing10mmsciaticnervedefectinrat，providingtheoryforthetherapy

6、ofnervegapinclinic．Methods：UsingchemicalmethodofTritonX·100andsodiumdeoxycholatetoeliminateSchwanncells，myelinsheathsandaxonsofmaleadultSDrats，obviateevokingaconspicuousrejection．Sixty—fourSPFfemalemrswererandomlydividedinto4groups．Exceptingnormalgroup(GroupD)，th

7、reegroupswererespectivelysetuptheanimalmodelofrightsciaticnervegapoflOmmandtreatedasfollow：GroupA，experimentalgroup，defectsofnervewererepairedwithextractedallografis．Postoperatively，adosageofATP，asatargetmuscleinjectionwasgivenonceadaytoeachratinthisgroup．GroupB，

8、controlgroupI，gapsofsciaticnervewerebridged、vitllautografis．GroupC，controlgroupII，gapswereleft．Evaluationoftherapeuticeffectincludedgaitanalysis，electrophysiol