紫外辐照导致植物细胞dna损伤的彗星电泳检测与生理指标的测定

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1、山东大学硕士学位论文符号说明AbbreviationsEnglishNames中文名称2．4—D2,4-Dichlorophenoxyaceticacid2．4．二氯苯氧乙酸6_BA6-Benzyladenine6．苄基腺嘌呤AmplifiedfragmentlengthAFLP扩增片段长度多态性ploymorphismCASPCometassaysoftwareproject彗星分析软件CATcatalase过氧化氢酶CMSCytoplasmicmalesterile细胞质雄性不育DMSODimethylsulfoxide二甲

2、基亚砜EBEthidiumbromide溴化乙锭ED’rAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸L诅Indole．．3．．aceticacid吲哚乙酸LSCMLaserscanningconfocalmicroscope激光扫描共聚焦显微镜MSMurashigeandSkoogbasalmediumMS基本培养基RAPDRandomamplifiedpolymorphicDNA随机扩增多态性RestrictionfragmentlengthRFLP限制性片段长度多态性pdymo叫smPALPhe

3、nylalaninammonialyase苯丙氨酸解氨酶PEGPolyethyleneGlycol聚乙二醇PODPer0)【idase过氧化物酶PVPPolyvinylpyrrolidone聚乙烯吡咯烷酮ROSReactiveOxygenSpecies活性氧SCGESinglecellgelelectrophoresisassay单细胞凝胶电泳SODSuperoxidedismutase超氧化物歧化酶SSRSimplesequencerepent简单重复序列UVUltraviolet紫外线"IrisTri一(hydroxymet

4、hyl)·aminomethane三羟基氨基甲烷TritonX．100TritonX-100聚乙二醇辛基苯基醚9原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个入和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：盖王牡El期：』匹厶址亚一关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交

5、论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅：本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。f保密论文在解密盾应遵守此规定>气论文作者签名：甬监导师签名：建疆日期：边盒￡：2山东大学硕士学位论文中文摘要彗星实验(cometassay)又称单细胞凝胶电泳(singlecellgelelectrophoresis，SCGE)，以电泳后细胞核DNA显示的显微镜荧光图像特征而得名，是用来定量分析和测定细胞核中DNA损伤程度的实验方法。可在单细胞水平上检测单

6、链／双链DNA断裂，DNA分子中碱性不稳定位点，DNA链中不完全切除修复位点和DNA分子内及分子间交联等损伤与修复的的方法，具有敏感、稳定、快速的优点。在国外已得到了广泛应用，在我国SCGE主要被用于对环境毒理学、离子射线损伤、自由基损伤、癌症放化疗、生物监测等领域。对植物的研究报道甚少。本实验设计是建立在前期所做的植物不对称体细胞杂交实验基础之上。实验发现柴胡、盐芥的原生质体分别经UV(3801．tW／em2)照射2min，5min后再分别与不同植物的原生质体融合，在所得的相应的体细胞杂种细胞中观察到柴胡和盐芥具有使异源染色质

7、消减与渐渗的现象。该结果与本实验室所作的大量有关小麦的体细胞杂交实验和国内外其它已报道的其它植物体细胞杂交实验的结果相反。为了进一步探讨柴胡、盐芥为什么可使受体染色质消减与渐渗，本实验拟以六种不同植物的原生质体(单、双子叶植物各三种)为研究对象，对经Uv辐照后导致细胞中DNA损伤测定的SCGE方法进行不同实验条件优化；利用CASP分析软件(cometassaysoftwareproject)对所得数据进行分析；综合评价不同UV照射剂量下各植物DNA损伤程度的差异；对喃照前后与DNA损伤修复相关的抗氧化酶及生物大分子化合物的变化情

8、况进行测定分析。选取的双子叶植物：柴胡(BupleurmscorzonerifoliumWilld．)，盐芥(Thellungiellasalsuginea)，拟南芥(Arabidopsisthaliana)。单子叶植物：小麦(TriticumaestivumL