ataba2转基因棉花鉴定和生理表型的分析

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1、关于学位论文独立完成和内容创新的声明本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学住论文是本人在导师冉勺指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本瓣究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。，蠢≯～。．擘簟?÷≯麓；“．学位中6鬻懋?I(=；学位豢≤≥赫羹墓名：≤塾塞竺竖-o。ow。

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7、¨戋手掌位论文著作板使用授权书一，、一一。一*。～

8、鼍。一o‘羹c誓豢嚣一瀵薹攀萋一本人经河南大学审核批准l酶毒囊洼譬住。作为学住论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留；硼；学稿瓣韵要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文(甄质文本和电子文本)以供罄焱检索、查阎jj本人授权河

9、南、大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等卧韵誊可璐采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇鳊学住论文(甄质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学位论文作者)签名：嫠!!兰皇垒20＼学住论文指导教师签名：20摘要干旱是我国主要的自然灾害之一，常常给农业生产带来很大的损失，严重影响了我国的重要经济作物棉花的产量。棉花是一种优良的天然纤维纺织原料，然而其种质资源缺乏，常规棉花抗旱育种是较困难的。目前，随着生物技术的发展，基因工程育种已成为一种有利的育种手段，即将外源基因通过生物技术转

10、入作物体内，使其整合到基因组中并得到稳定的遗传和表达到达定向地改造生物形状的目的。因此，培育耐旱、抗旱的棉花是从根本上解决干旱影响棉花产量的措施显得非常重要。脱落酸(ABA)这种激素在植物中是非常重要的，它在种子发育中调节休眠方面起着关键的作用，同时调节气孑L的关闭，参与在植物逆境下的反应。己知拟南芥中3种基因AtABA』．4tABA2—4tABA3在合成脱落酸(ABA)过程中起着关键的作用。本论文通过转基因技术提高棉花合成ABA(尤其在胁迫条件下)能力，以期提高棉花的耐旱性。本论文以冀合713、coker201的胚性愈伤组织为受

11、体，利用农杆菌介导法成功导入了AtABA2基因。利用花粉管通道法将AtABA2基因导入了新陆早35、36母、中棉所16三个品种，后者得到了大量的转基因植株。利用田问喷洒抗生素和PCR鉴定的方法进行筛选，将得到的阳性植株扩大培养。利用分子杂交技术确认AtABA2基因已经整合到T4带转基因棉花植株，且都是单拷贝。此外，我们分析了转基因棉花和未转基因空白对照植株在干旱胁迫处理后的AtABA2基因的表达情况，RT-PCR结果显示转基因棉花体内AtABA2基因均有表达。并对转AtABA2基因的棉花植株和空白对照幼苗干旱处理后，观测其生长状况

12、，并测定了其离体叶片失水率相关指标。比较了干旱胁迫后其气孔的形态和密度以及侧根的生长状况。发现无论是长势还是失水率方面，转基因植株表现均较好，而其气孔的形态和密度以及侧根在数量上和均长上几乎没有区别。综合分析表明转AtABA2基因提高了棉花的耐早能力。关键词：花粉管通道法，农杆菌介导法，转基因，AtABA?基因ABSTRACTCottoncanprovideexcellentnaturalfiber,whichisanexcellenttextilematerialduetoitslowcost，largeoutputandgoo

13、dthermalproperties．Owingtolackofcottongermplasmresource，lessprocessismadeinCottontraditionalbreeding．Greatprogresshasbeenmadeinbiotechnology,suchastheintroductionofallexogenousgeneintothecropgenometoinheriteandexpresssteadily,thusmodifyorganisms．CoRonisaveryimportante

14、conomiccrops，Chinaisabigcotton—producingcountries．Droughtisthemostinfluentialfactortotheglobalagriculturalproductionandcause