大叶藻提取活性物质对仿刺参“腐皮综合症”病灶优势菌与白脊藤壶幼体附着抑制研究论文

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1、大叶藻(ZoteramarinaL．、)提取活性物质对仿刺参(Apostichopusjaponicus)“腐皮综合症’’病灶优势菌及白脊藤壶(BalanusalbicostatusPilsbry)幼体附着抑制研究摘要本文主要研究了大叶藻(ZoteramarinaL)提取物对仿刺参(Apostichopus／aponicus)“腐皮综合症’’致病菌(C6)及病灶优势菌(TB、BP4、4)的抑菌活性及白脊藤壶(BalanusalbicostatusPilsbry)金星幼体附着的抑制作用。大叶藻采自青岛海域，将大叶藻洗净、阴干、粉碎、过40目筛绢得大叶藻粉末，用150

2、ml95％的乙醇提取大叶藻粉末得粗提物，粗提物经乙酸乙酯及去离子水萃取得提取液A水相及提取液A乙酸乙酯相，配制0．19／mL溶液用于继续研究。提取液A水相及乙酸乙酯相对仿刺参“腐皮综合症”致病菌(C6)及病灶优势茵(TB、BP4、4)进行抑菌活性研究，经双碟法抑菌，抑菌实验结果表明提取液A水相具有抑菌活性，抑菌圈直径分别为13．53cm(C6)、12．13cm(TB)、13．62era(BP4)、9．22em(4)。而提取液A乙酸乙酯相没有抑菌活性。实验选取金黄色葡萄球菌与受试菌对照，同时选取甲氧苄啶(TMP)和磺胺异恶唑(SIZ)为提取相阳性对照。大叶藻提取液A

3、水相的最低抑菌浓度(MIC)为12．89／ml。经薄层层析(TLC)纯化分析，提取液A水相得到六条条带。比较提取液A水相与提取液A水相活性组分之间的抑菌结果表明，菌4对提取液A水相各组分的抑菌活性是仿刺参四种受试菌中最敏感，而对提取液A水相最不敏感，证实活性组分之间互相拮抗，所以单一活性组分的抑菌活性比大叶藻提取液A水相的抑菌活性强。本文继续研究了大叶藻的提取液A水相对白脊藤壶幼体的附着抑制效果。实验藤壶为常见白脊藤壶(BalanusalbicostatusPilsbry)金星幼体。冯丹青建立的白脊藤壶金星幼体附着抑制实验中最佳实验条件为：温度，30℃；盐度，35

4、；幼体密度，5只／ml；附着基，聚苯乙烯。研究通过建立的白脊藤壶金星幼体的实验模型研究大叶藻提取液A水相对白脊藤壶金星幼体的抑制结果，实验设立了大叶藻提取液A水相四个浓度梯度：10、50、100、500和1000mg／L．。24小时培养实验结果表明10m童／L体系白脊藤壶金星幼体的附着率为56．78％；50rng／L体系白脊藤壶金星幼体的附着率为47．23％；lOOmg／L体系白脊藤壶金星幼体的附着率为20．18％；500mg／L体系白脊藤壶金星幼体的附着率为4．32％：1000mg／L体系东方小藤壶金星幼体的附着率为0％，白脊藤壶金星幼体的附着率为0％。大叶藻活

5、性物质的提取结果证实大叶藻提取物具有广泛的活性，同时大叶藻分布广泛，因此大叶藻的提取物具有巨大的应用潜力。关键词：大叶藻；仿刺参。腐皮综合症一病灶优势菌：白脊藤壶金星幼体llTheactiVitiesofextractfromZosteramat"inaL．inthepreventionofakindofApostichopusjaponicusskinuIcerationdiseaseandthesettlementofBa／anusa／b／costatusPiIsbrycypridAbstractAbstract：Thepurposeofthisstudywa

6、stoinvestigatetheantibacterialactivityofextractsfromZosteramarinaagainstthebacterialthathadbeenseparatedfromal(indofApostichopusjaponicusskinulcerationdiseasepreviously．A95％ethanol(v／v)solventwasusedtoextractZosteramarinaat50oC．Aqueousextract(ZA)showedobviousbacteriostaticeffectagains

7、tthetestedbacterialstains(inhibitionhalodiametersbetween8．23nllTland13．62mm)，whereastheethylacetateextract(ZE)Wasalmostinactive．Theminimalinhibitoryconcentration(MIC)valuesofZAagainstfourpathogenswerehomogeneousat12．8mg／mi．Thinlayerchromatography(TLc)assaywasusedtoanalyzeZA，sixfractio

8、nswer