干扰tigar基因增强表阿霉素对hepg2细胞凋亡诱导作用的实验的研究

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1、．．．．．一学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学·本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口，，。’本学位论文属在年月解密后适用本规定。非涉密论

2、文口论文作者签名：导师签名：日期：干扰TIGAR基因增强表阿霉素对HepG2细胞凋亡诱导作用的实验研究中文摘要干扰TIGAR基因增强表阿霉素对HepG2细]胞凋亡诱导作用的实验研究中文摘要目的：探讨干扰TIGAR基因是否能增强表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用方法：化学合成荧光标记的TIGAR—siRNA，通过WESTERN-BLOT检测其干扰效能；噻唑蓝(MTT)实验计算表阿霉素(EPI)对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)，通过Westernblot澳l定细胞经RNA干扰和／或表阿霉素处理后的TIGAR蛋

3、白表达情况，利用Hoechst染色，流式细胞术检测细胞经处理后的凋亡情况。结果：细胞经RNA干扰后的Westernblot显示TIGAR-siRNA可高效干扰TIGAR蛋白表达，干扰后约72小时干扰效果最佳。MTT结果分析显示表阿霉素对HepG2细胞IC50为1．916pg／ml。Westernblot结果显示表阿霉素可增力ITIGAR蛋白表达，但可被TIGAR-RNAi高效干扰。Hoechst染色及流式细胞术凋亡分析结果揭示，随EPI浓度增加，细胞凋亡增加；TIGAR-RNAi本身并不ll三JI起明显的细胞凋亡，但可

4、增hlEPI的凋亡诱导作用，在各浓度组，TIGAR—RNAi均可增加表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用。结论：干扰TIGAR基因可增强表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用关键词：TIGAR，表阿霉素，HepG2细胞，凋亡作者：沈正海指导教师：吴浩荣教授I英文摘要干扰TIGAR基因增强表阿霉素对HepG2细胞凋亡诱导作用的实验研究SilencingTIGARgeneincreaseapoptosisofHepG2cellsinducedbyEpirubicinAbstractObjective：Tostudywhe

5、thertheinhibitionofTIGARgeneexpressioncouldstrengthentheapoptosiseffectinducedbyEpirubicin．Method：Tochemosynthesizeafluorescently-labeledTIGAR-smallinterferingRNAtargetingTIGARmRNA．TheinterferingefficacywastestedbyWesternblotanalysis．MTTassayWasusedtodetermineth

6、e50％inhibitingconcentration(IC50)thatEpirubicinactsonHepG2cells．UsingwesternblotmethodtoexaminetheexpressionofTIGARproteininHepG2cellstreatedwithEpirubicinand／orRNAi．DAPlwasusedtostainthecellstoobserveapoptosis．Forcellapoptosisassay，flowcytometrywasused．Results：

7、AnalysisbyWesternblotshowedthebasicexpressionofTIGARproteinishigh．TheTIGAR-siRNAinterferingeffectisfme．AnalysisofMTTassayshowed，theIC50，EpirubicinactingonHepG2cells，is1．916

8、Ig／m1．TheresultofWesternblotshowedinonegrouptreatedwithEpirubicin，theexpressionofTIGARpro

9、teinupgradedwithincreaseofEpirubicinconcentration．；bycontrast，intheothergrouptreatedwithEpirubicinandRNAi，theexpressiondecreaseddramatically,andbarenorelationwiththet