臭氧对兔膝关节骨性关节炎作用的实验的研究(7302)

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1、中文摘要退行性骨关节炎(degeneratireOSteoarthritiS0A)病因尚未完全明了，目前认为是多因素致病，临床上采用医用臭氧(O，)关节腔内注射治疗早～中期OA取得了较好的疗效，但0，的作用效应及其治疗机理目前仍不甚明了，本实验采用Hulth模型造模后，在兔膝关节腔内注射臭氧(0，)，探讨O。抑制软骨细胞退变作用效应及机理，为医用O，治疗早一中期OA提供实验支持。一、03对关节软骨的病理改变的影响目的：观察O，对Hulth模型OA软骨光镜下改变的影响。方法：32只兔随机分为2组，分别为治疗组16只，模型组16只

2、，采用Hulth模型，白手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：一O，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：2ml，连续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，行大体观察，锐利刀片切取左股骨内髁软骨，将软骨标本置于10％甲醛中固定，经一系列脱水、10％EDTA脱钙处理，共10天；软骨组织石蜡包埋；腿染色，生物显微镜观察。结果：0，实验组软骨表面细胞

3、变性、排列紊乱、可见软骨细胞坏死、脱落，少量的炎性渗出物，软骨表面可见糜烂斑，成纤维细胞和毛细血管增生相对少见；0A对照组软骨表面细胞排列紊乱、坏死、变性较实验组明显，可见明显的溃疡，达深层软骨，可见明显的炎性细胞渗出及成纤维细胞和新生的毛细血管增生，可见纤维组织增生于溃疡底部及溃疡底部的软骨细胞变性。结论：03试验组关节软骨退变的程度较OA对照组减轻，软骨缺损也较轻，表明40mg／LO：一O，的混合气体能有效延缓兔膝关节骨关节炎的软骨退变的病理进程。目的：观察0，对Bulth模型OA软骨电镜下改变的影响。方法：32只兔随机分

4、为2组，分别为治疗组16只，模型组16只，采用Hulth模型，自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：一0，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40mg／L0：2ml，连续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，行大体观察，锐利刀片切取左侧股骨内髁关节软骨修剪成1×1×2mm的小条；3％戊二醛酸固定24小时；O．1M磷酸缓冲液冲洗3次；0．1％四氧化锇固定90m

5、in；去离子水冲洗3次；不同浓度丙酮逐级脱水；脱钙液脱钙后以61G环氧树脂浸透、包埋、硬化后修块，半薄切片；定位后切0．05ram超薄切片，电子染色后电镜观察。结果：OA对照组大部分的软骨细胞明显肿胀且形态不规则，细胞周晕消失，粗面内质网明显扩张，微绒毛断裂且变短，粗面内质网网膜溶解断裂，胞浆内可见脂滴存在；细胞核形态不规则，细胞核严重变形、凹陷，出现腔隙陷窝及囊泡形成等改变；0，实验组软骨细胞大部分均正常，细胞为椭圆形或梭形，细胞核完整，可见细胞核内异染质轻度边集，线粒体散在分布于胞浆内，粗面内质网较对照组丰富，表面可见许多

6、微小突起。结论：03试验组的关节软骨细胞退变的程度较oA对照组减轻，软骨缺损也较轻，表明0，能有效延缓关节软骨退变的病理进程。二、03对软骨细胞中IL-1B表达的影响目的：观察O，对Hulth模型OA软骨细胞中IL-1B表达的影响。方法：将36只兔随机分为3组，分别为治疗组16只，模型组16只，正常组4只，采用Hulth模型，自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：一0，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：

7、2ml，连续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，耳缘静脉注入空气栓塞处死实验兔，造模的左膝关节备皮，消毒，切开膝关节，刀片切取左侧股骨内髁软骨修剪成1×1×2mm小条，3％戊二醛酸溶液固定24小时；DAB法检测软骨细胞IL一1D；每张切片在软骨破坏的边缘随机选取视野，每个视野计数200个细胞，统计阳性染色细胞的个数，以阳性细胞率作为IL-1D的表达指标。结果：正常组(A组)阳性细胞率为2．815士0．827％，模型组(B组)阳性细胞率为47．159士4．431

8、'／,①，0，治疗组(c组)阳性细胞率为27．771士4．085％②；模型组(B组)与正常对照组(A组)比较，p<0．01；治疗组(C组)与模型组(B组)比较，p<0．05，有统计学意义。结论：实验组软骨细胞中IL-1D含量低于对照组，提示O，能够降低软骨细胞中IL-1p含量