辅助生殖技术中受精障碍的预测与补救

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1、山东大学博士学位论文签署知情同意书，本研究经过山东大学附属省立医院伦理委员同意。结果①I组患者卵子在授精后3、4、5h第二极体排出率均低于II组(PO．05)，I组补救性ICSI部分卵子与IVF部分卵子的优胚率无显著性差异，但I组补救性ICSI部分卵子优胚率低于II组和对照组(P(O．05)。结论IVF中精卵共培养3h是可行的；授精后5h第二极体的排出可作为卵子激活的征象；授精后5h行补救性ICS

2、I可以获得可观的临床结局，且不会增加多精受精率；低受精率可能更容易出现在原因不明性不孕及原发不孕患者。2【关键词】短时受精；极体；补救性卵胞浆内单精子显微注射山东大学博士学位论文第二章两种化学激活方案在卵胞浆内单精子显微注射未受精卵子补救中的应用中文摘要目的卵胞浆内单精子显微注射(Intracytoplasmicsperminjection，ICSI)的出现，克服了正常生理过程中精子需要克服的重重障碍，解决了大部分重度少、弱精子症患者的生育问题。然而在实际工作中遇到ICSI也不能解决的问题时，如ICSI受精率低甚至完全受精失败，胚胎学家们应该如何去处理?如何最大可能的挽救患者未

3、受精卵子?本研究的目的是探讨A23187及嘌呤霉素在ICSI后未受精卵子补救中的应用。方法(1)2010年8月---2011年8月在山东大学附属省立医院生殖医学中心第一次接受ICSI治疗的患者，ICSI时所用精子形态基本正常，若在D1观察原核时发现受精率<30％，则剩余部分未见原核卵子在ICSI后22小时之内进行激活处理：随机分为2组：(1)5pmol／L钙离子载体A23187中37"C处理5min，然后转移至lOlag／ML嘌呤霉素37。C6％C0z中培养4小时；(2)5tunol／L钙离子载体A23187中37。C处理30min，转移至常规培养液中培养。分析激活后受精、胚胎

4、发育情况。(2)若在D1观察原核时发现完全受精失败，则用患者丈夫的精子与科研卵子行ICSI，进行科研验证患者丈夫精子是否存在受精功能缺陷。每份精子至少与3个卵子行ICSI。所有患者均签署知情同意书，本研究经过山东大学附属省立医院伦理委员批准。山东大学博士学位论文结果(1)A23187联合嘌呤霉素组：共有9名患者，共32枚卵子接受激活，激活卵子22枚，2PN为7枚，2-4细胞期胚胎16枚，5-6细胞期胚胎3枚，没有胚胎继续发育到>7细胞；A23187激活30分钟组：共有7名患者，共39枚卵子接受激活，激活卵子34枚，2PN为8枚，2-4细胞期胚胎23枚，5-6细胞期胚胎2枚，>7

5、细胞期胚胎I枚。两组激活率、2PN率、IPN率、卵裂率、2-4细胞期胚胎率、5—6细胞期胚胎率均无统计学差异(P>0．05)(2)共有8名患者接受精子验证试验，没有患者再次发生完全受精失败。结论(1)A23187联合嘌呤霉素、A23187两种方法均可以应用于ICSI后未受精卵子的补救处理，从简单、安全的角度可以优先选择A23187激活30分钟；(2)在ICSI时能挑选形态基本正常精子的患者中，ICSI受精率低或者受精失败更主要是由于卵子因素引起。霉素4【关键词】化学激活；卵胞浆内单精子显微注射；受精失败；A23187；嘌呤山东大学博士学位论文第三章钙离子载体A23187在卵胞浆

6、内单精子显微注射反复受精率低患者的应用中文摘要目的尽管卵胞浆内单精子显微注射(Intracytoplasmicsperminjection，ICSI)可以解决大多数体外受精中遇到的低受精率或者受精失败，但实际工作中还是会遇到ICSI后受精率低甚至受精完全失败，困扰着临床医生和胚胎学家。如何将实验研究充分的应用于临床工作，更好的为患者服务?本研究的目的是探讨钙离子载体A23187在ICSI反复受精率低甚至受精失败的高受精风险患者的临床应用价值。方法(1)2010年8月～2011年8月在山东大学附属省立医院生殖医学中心接受ICSI治疗的患者中，患者病史中至少一个周期ICSI受精率<

7、30％，这部分患者的卵子在ICSI注射后30分钟，随机分为两组：A23187组：随机选取1／2～2／3的卵子接受5州LA23187处理5分钟，然后转移至常规受精培养液中进行培养；对照组：未接受激活的剩余卵子。分析激活后受精率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、种植率，并与对照组进行比较分析。所有患者均签署知情同意书，本研究经过山东大学附属省立医院伦理委员同意。(2)将5“mol／L设为标准浓度，分别采用1×、2X倍、4X倍标准浓度A23187及1．6％DMSO分别处理卵裂期斑马鱼受精卵(受