粒毛盘菌ym281多糖的发酵、结构与其降脂利肝活性研究

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1、粒毛盘菌YM281多糖的发酵、结构及其降脂利肝活性研究摘要本文对粒毛盘菌YM281多糖的发酵产量、纯化、结构及降脂利肝活性行了研究，主要结果如下：对粒毛盘菌YM281胞内多糖(LIP)、胞外多糖(LEP)产量进行同步优化。结果表明，LIP产量(Y)与生物量(Z)呈显著的线性关系：Z=12．561Y一0．0148；LIP产量(Y)与LEP产量(X)呈正相关，但线性关系并不显著，因此为了同步提高二者的产量，利用满意度函数将两个响应变量(X、Y)整合到单一目标响应变量中，并结合均匀设计对粒毛盘菌YM281产LIP、LEP的发酵条件进行同步优化，在所得最佳发酵条件(葡萄糖46．69／L，酵母膏

2、14．69／L，甘氨酸6．50mg／L，初始pH7．5，25℃发酵12天，其他条件同基础发酵条件)下，LIP和LEP产量分别为2．359／L和6．289／L，较优化前分别提高了1．4倍和1．2倍。对粒毛盘菌YM281胞外多糖的纯化、结构、构象进行研究。结果表明，粒毛盘菌YM281胞外多糖(LEP)经CelluloseDEAE．52、SepharoseCL一6B柱层析获得单一组分(LEP．1b)，采用高效液相凝胶渗透色谱法(HPGPC)测得LEP．1b分子量约为4．02×104Da。经酸水解、甲基化分析、高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解、UV、IR及NMR分析推断LEP．1b是一种

3、(1_3)．，(1_6)一p—D一葡聚糖。LEP—lb主链是由p．1，3一D-吡喃型葡萄糖残基组成，平均每5个葡萄糖残基为一个重复单元，每个重复单元具有一个支链，支链由2个D．吡喃型葡萄糖残基以p．1，3．键型组成，并以D．1，6．键连接在主链葡萄糖的6位碳上，其重复单元如下：fl-D-Glcpl上3fl-D．-Glcp1J，6—籽)印-D—吼cp(1—躬)够-D—Glcp(1硝)侈-D—@cp(1—鹑)侈_D—Glcp(1专3)印．D—Glcp(1_且构像分析表明LEP一1b具有三螺旋构象。对粒毛盘菌YM281胞外多糖(LEP一1b)的降脂利肝活性进行研究。结果表明，LEP一1b能有

4、效降低高血脂性脂肪肝模型小鼠血清脂质(TC、TG、LDL．C)水平、肝脏脂质(TC、TG、脂肪)水平及动脉粥样化指数(AI)，增加血清HDL．C水平，增加粪便脂质(胆汁酸、TC、脂肪)排出量，降低血清转氨酶(ALT、AST)活性、肝组织丙二醛(MDA)含量及肝脏指数，增加肝组织超氧歧化酶(SOD)活性，促进肝组织损伤修复，且呈一定的量效关系。以上结果表明LEP．1b对高血脂性脂肪肝模型小鼠有降脂利肝作用。关键词：粒毛盘菌YM281；多糖；纯化；结构；降脂利肝Fermentation，structure，lipidloweringandliverprotectingactivitieso

5、fpolysaccharidesproducedbyLachnumYM281ABSTRACTInthispaper，theyield，purification，structure，conformationandlipidloweringandliverprotectingactivitiesofpolysaccharidesprouducedbyLachnumYM281werestudied．Themainresultswereasfollow：Simultaneousimprovementoftheyieldsofintracellularpolysaccharide(LIP)and

6、extracellularpolysaccharide(LEP)prouducedbyLachnumYM281insubmergedcultivationwasstudied．ResultsshowedthattherewasasignificantlinearrelationshipbetweentheyieldofLIP(Y)andthebiomass(Z)：Z=12．561Y一0．0148．TheyieldsofLIP(Y)andLEP(X)werepositivelycorrelated，butthelinearrelationshipwasinsignificant．Acco

7、rdingly，inordertoimprovethetwosynchronously，thetworesponsevariables(X，Y)wereintegratedintoasingleresponsevariableusingthedesirabilityfunctionsandthefermentationconditionsofLIPandLEPofLachnumYM281wereoptimizedsynchronouslybyu