甘薯叶柄藤中试综合提取的活性多糖、类黄酮构成与生理活性研究

甘薯叶柄藤中试综合提取的活性多糖、类黄酮构成与生理活性研究

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时间:2019-02-02

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1、摘要我国是世界上甘薯栽培面积最大的国家,薯蔓资源丰富,年产干薯蔓达3.5x10lokg。目前对我国这~巨大的资源加工利用极少,大部分都当做废弃物,造成资源浪费和环境污染。本文从开发利用这一丰富的资源出发,首次采用综合提取工艺,选择当家品种徐薯18薯蔓为原料,中试提取其中的活性多糖及黄酮类化合物,余渣经高新技术制备特种纤维,生产优质高效的保健食品和药品基料,使农产品废弃物薯蔓变“废”为宝,资源高效利用,产品结构多样化。了解薯蔓中试综合提取活性多糖(PSPV)和黄酮类化合物(FSPV)的化学构成和生理活性,为其工业化生产奠定基础、开发保健食品提供理论依据。本文以PSPV

2、和FSPV为受试物,分别对受试体、行体内氧化、体外抗氧化、降血脂、降血糖、抗肿瘤、免疫调节等生理活性的系统研究。研究结果如下。1、PSPV的物化性质研究制各出PSPV溶液,经冻干后得PSPV粉未。PSPV粉未多糖纯度为93.5%。UV法及IR法检测证明其有多糖的特征吸收谱,为高纯度的多糖。采用DEAE.纤维素柱分离,得到三个级份的多糖,经高效凝胶过滤色谱法,测定其分子量分布。气相色谱分析单糖组成。结果:从6月中旬的PSPV中得到25.3%的PSPVI,分子量分布为:6.2Y8x104,单糖组成为D.木糖、D.甘露糖和D.葡萄糖。10月中旬的PSPV得到二个级分PSP

3、VII和PSPVⅡI,分子量分布分别为:3.801X104和1.418x104,PSPVII由D.甘露糖和D一半乳糖构成;PsPvIⅡ由D一葡萄糖、D.木糖和L.鼠李糖构成。2、FSPV的黄酮类化合物构成研究利用HPLC.ESI.MS对FSPV进行分析,从获得的质谱分子量信息,初步鉴定出了染料木素、木犀草素、槲皮索、刺芒柄花素、芹菜素、山奈酚等6个主要的黄酮甙元。进~步结合HPLC,通过与标样保留时间相同,确定FSPV中存在:染料木素、木犀草素、香豆素、槲皮索、刺芒柄花素、芹菜素、山奈酚7种黄酮甙元。其中,首次报道薯蔓中存在染料木素、刺芒柄花素。.3、PSPV、FS

4、PV的体外抗氧化作用,分别利用PSPV和FSPV为受试物,进行自由基的清除和抑制脂质过氧化实验。黄嘌呤与嘌呤氧化酶反应系统试剂盒测定FSPV和PSPV对u2:的清除率:Fenton反应试剂盒测定FSPV和PSPV对·OH的清除率;硫代巴比妥酸(TBA)法测定二者对亚油酸的抗氧化性;并测定了FSPV对DPPH的清除率。结果表明,FSPV对DPPH的清除效果良好(IC50=8.60mg/L),但弱于VC(IC50;6.07mg/L)和芦丁(IC50=5.99mg/L)。FSPV对u2’清除能力IC30为14.56mg/L,PSPV为12mg/mL,强于芦丁,但弱于VC。

5、FSPV对·OH的清除能力IC50为13.38mg/L,强于VC,与芦丁相当。PSPV对·OH清除率IC50为1lmg/L,强于芦丁和VC。PSPV和FSPV对亚油酸也有很好的抗氧化作用,0,20%FSPV对亚油酸抗氧化能力优于0.10%BHT,O.20%PSPV与O.10%BHT相当。4、PSPV、FSPV对老龄小鼠的体内抗氧化作用研究了PSPV和FSPV分别对老龄小鼠的体内抗氧化作用。采用试剂盒分别测定老龄小鼠血清、心、肝、肾组织中MDA和LPF含量、SOD和GSHpx酶活性和TAOC。结果表明,FSPV可显著或极显著降低血清及各组织中MDA和LPF含量,提高T

6、AOC,但对SOD和GSHpx活性无显著影响;PSPV可显著或极显著地提高SOD和GSHpx活性和TAOC,并降低MDA和LPF含量。虽然作用机制不同,但FSPV和PSPV都能有效地提高机体组织抗氧化能力,防止组织脂质的过氧化损伤。体外、体内抗氧化结果表明,PSPV和FSPV具有显著的抗氧化作用,可以作为天然抗氧化剂开发利用。5、PSPV、FSPV对高脂大鼠的降血脂作用利用实验性高脂血症大鼠模型,分别观察PSPV和FSPV的降血脂作用及对脂肪肝的预防作用。以高脂饲料持续饲喂大鼠8w,每2w采血一次,直接测定血清TC,TG,HDL—C含量,并由公式计算HDL-C/TC

7、,LDL.C和AI值;采用石油醚索氏抽提测定肝脏中粗脂肪含量,石蜡切片、光镜观察肝脏组织形态学结构。结果表明,PSPV和FSPV可显著地降低实验性高血脂大鼠的血清TC,TG,LDL.C和AI,FSPV并有升高HDL—C/TC值的作用,二者具有明显的改善脂质代谢,降低血脂,预防动脉粥样硬化的作用。其降血脂作用表现出明显的量效关系和时效关系,PSPV以高剂量(400mg/kg.bw.d),FSPV以低剂量(100IIig瓜g.bw.d)效果最佳。PSPV还使受试lI大鼠的脏体比下降。高剂量PSPV组的脾腺指数增加明显,这提示PSPV具有提高受试大鼠免疫功能的作用。肝

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