再血管化坏死骨修复胫骨骨髓炎骨缺损的实验的研究

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1、第二举医大学博出学位论文英文缩写DBMBN伊琵BHELUlCI班SABNCFUSM、阳CSEMEo豫缩咯词表英文全名DecalcifiedBoneMatrixtissueengineeringboneStaphylococcusaureus(S．aureus)BoneNecrosisColonyForming蛐SodiumMorthua钯珊dteBloodCellsScanningElectronMicrOscopeEthyleneOxide中文全名脱钙骨基质骨形态发生蛋自组织工程骨苏木精一伊红染色髓腔内急性炎症反应髓腔内慢性炎症反应骨膜炎症反应金黄色葡萄

2、球菌骨坏死菌落形成单位鱼翳油羧镳自细胞扫描电镜环氧乙烷转化生长因子再血管化坏死骨修复胫骨骨髓炎骨缺损的实验研究VEGFMFVPVascularEndothelialGrowthFactor血管内皮生长因子MuscleFlapwithVesselPedicle带血管蒂肌瓣．7．独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导Tilth'导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者虢孑蜂签字

3、嘞?蜞淬‘月?曰学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文储虢彦啤翮躲静签字蜀期扣3年f月岁日签字目期：坼Z胃岁冒再血管化坏死骨修复胫骨骨髓炎骨缺损的实验研究摘要一实验目的临床高能量损伤造成的开放性骨折常发生骨鬣炎并骨质外露坏死，手术清创后常造成节段性骨缺损。感染性骨缺损的修复

4、重建非常困难。我们试图通过模拟临床创伤后骨髓炎的发病机制建立动物模型，在此模型基础上以骨髓炎坏死皮质骨为研究对象，制备出部分脱钙骨基质并设法恢复其血运，同时结合显微外科技术来修复胫骨感染性骨缺损。二实验方法：(一)第一部分伴软组织缺损的创伤后骨髓炎皮质骨坏死动物模型的创建。以雄性Wistar大鼠为研究对象，随机分为两组，实验组和对照组各lO只，共20只。在大鼠胫骨干制造4mmx8mm皮质骨缺损，将3×106cfu金黄色葡萄球菌和异物(纱布)接种到胫骨骨缺损处髓腔内，并将游离骨块回植到缺损区，外翻缝合软组织使骨质外露，对照组不接种金葡菌。术后2W、4W观察记

5、录一般情况，行放射学、病理组织学检查。定量数据采用SPSS12．0统计软件处理。术后通过病理组织学和放射学方法评价骨髓炎及骨坏死的情况。(二)第二部分’●大鼠骨髓炎坏死皮质骨脱钙骨基质制备及理化性质和生物力学测定。以大鼠骨髓炎坏死皮质骨和j下常新鲜皮质骨作为研究对象，按改良Urist法将骨髓炎坏死皮质骨经脱钙脱脂处理得到部分脱钙骨基质，扫描电镜观察测量其孔隙度，全自动生化分析仪测量其钙含量并计算脱钙率，生物力学仪测量其形变一负荷曲线。(三)第三部分自体骨髓炎坏死皮质骨脱钙骨基质再血管化并修复骨缺损的实验研究。以骨髓炎骨坏死模型造模后的雄性Wistar大鼠为

6、研究对象，随机分成两大组，腹部包埋组：其中实验组和对照组各9只，共18只；骨缺损修复组22只，共40只。所有大鼠取腹部切口显露腹壁浅动脉，将骨髓炎坏死皮质骨部分脱钙骨基质灭菌后，无菌条件下包第二军壤大学巷士学镶论文埋于双侧腹壁浅动脉肌瓣中，对照组将未脱钙坏死皮质骨包埋予相同肌瓣中。腹部包埋组术后lW、2W、4W实验组和对照组各处死3只动物，取材行病理组织学检查观察血管化情况。骨缺损修复组22只大鼠于腹壁浅动脉肌瓣包埋后2W，将部分血管化的坏死皮质骨脱钙骨基质连同腹壁浅动脉带蒂肌瓣转移填充于胫骨骨髓炎骨缺损处，术后4W、8W、12W行经放射学和病理组织学检查

7、骨髓炎及缺损修复情况。三结果(一)第一部分实验组大鼠术后体重下降，体温和WBC升高，放射学检查见髓腔内骨质破坏，骨皮质变薄，骨膜反应和软组织肿胀阴影，部分出现病理性骨折。病理组织学见髓腔内大量炎细胞浸润，曹小粱部分溶解、吸收、稀疏、坏死，骨细胞坏死，骨陷窝空虚。对照侧仅表现为轻微的炎症反应，无明显骨髓炎征象。(二)第二部分骨髓炎坏死皮质骨经脱钙脱脂后形成部分脱钙骨基质，平均钙含量为92．17±O．54mg／g，脱钙率为38．1％。扫描电镜显示：坏死皮质骨脱钙骨基质表面凹凸不平，包含两种微孔结构，直径在7～151am和0．1--．-0．41am之闻，微孔之间

8、相互沟通共同形成筛孔样结构，与正常新鲜皮质骨DBM比较，无明显差异