hsp60和hsp90在外阴硬化性苔癣与外阴鳞癌中的表达与意义

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1、·中文论著摘要·HSP60和HSP90在外阴硬化性苔癣及外阴鳞癌中的表达及意义目的热休克蛋白(heatshockproteins，HSPs)又称应激蛋白，是生物细胞(包括原核细胞和真核细胞)在热刺激、缺血、缺氧、过氧化、紫外线、外伤感染、乙醇，亚砷酸钠砒霜和重金属等应激源刺激后，发生热休克反应所产生的，是维持细胞生命活动所必需的蛋白质。除具有分子伴侣作用，还有参与肿瘤免疫、细胞凋亡等功能。近年来研究表明HSP60、HSP90在口腔鳞癌、宫颈癌、膀胱癌、胃癌等肿瘤中高表达，因此，HSP60、HSP90与肿瘤的发生发展，肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭转移及

2、肿瘤的预后均有着密切的关系。但其与外阴疾病之间是否存在一定的关联尚不明确，因此，本研究将检测外阴硬化性苔癣及外阴鳞癌中HSP60及HSP90的表达情况，探讨其与外阴疾病之间的关联。一、材料材料与方法1、标本选自中国医科大学附属第一医院妇科教研室1998—2011年经手术切除活检存档的蜡块，外阴鳞癌(VSCC)23例，外阴硬化性苔癣(VLS)21例，外阴正常皮肤11例。所有患者病理资料完整，标本均经病理学证实，均未经放化疗及激光等物理治疗。2、试剂鼠抗人HSP60多克隆抗体(工作浓度1：100)购自英国Abcam公司；鼠抗人HsP90多克隆抗体(工作

3、浓度1：100)购自武汉博士德生物工程有限公司；即用型SP试剂盒及DAB显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。二、实验方法与原理1．方法：采用SP免疫组织化学方法分别检测外阴正常组织、外阴硬化性苔癣及外阴鳞癌中HSP60及HSP90的表达情况。2．原理：利用抗原抗体特异性结合，采用生物素标记的第二抗体与链霉素抗生物素蛋白连接的过氧化物酶来测定组织和细胞中的抗原。三、免疫组化染色结果判定标准在光学显微镜下观察以细胞浆或细胞核出现黄色或棕黄色颗粒者为阳性，利用显微图象分析系统MetaMorph(UIC／OLUMPUS．US／JP)进行积分光密度测定，

4、每张切片选取5个不同高倍视野，计算同一张切片的平均积分光密度值。四、统计学方法利用SPSSl7．0统计分析软件，各组计量资料结果进行t检验，P

5、性细胞的平均光密度值0．2478_-+0．0159，两者无显著性差异(P>O．05)；在VSCC中癌巢中阳性细胞多表达于胞浆，HSP60蛋白广泛分布在真皮内的癌巢中，且范围很广，阳性细胞表达略高于正常外阴组织(图3)，阳性率为73．91％，HSP60蛋白表达阳性细胞的平均光密度值0．2563+_0．0107，与正常相比有统计学差异(P<0．05)。2、HSP90蛋白在外阴不同组织中的表达情况2HSP90蛋白表达于细胞浆，呈棕黄色颗粒，HsP90在外阴正常皮肤阳性细胞高表达多位于表皮全层(图4)，阳性率为81．82％，阳性细胞的平均光密度值0．225

6、8_+0．0081：在VLS中阳性细胞位于表皮全层(图5)，间质近阴性或少量阳性表达，阳性率为95．24％，VI．S中表达阳性细胞的平均光密度值0．2117_+0．0311，与正常相比有显著性差异口<0．05)；在VSCC中癌巢中呈阳性表达，但阳性细胞表达少于正常外阴皮肤组织，在真皮下的癌巢中表达面积广泛，阳性细胞多位于胞浆(图6)，阳性率为78．26％，阳性细胞的平均光密度值0．2158_4-0．0039，与正常相比有统计学差异(P

7、鳞状细胞癌中HsP90低表达，其稳定影响细胞增殖受体的作用降低，进而促进肿瘤细胞增殖。3、外阴硬化性苔癣中HsP90低表达，其抑制细胞凋亡作用减弱，进而促进细胞凋亡增加。关键词HSP60、HSP90、外阴鳞癌、外阴硬化性苔癣、免疫组化3·英文论著摘要·ExitandSil：nificanceofHSP60andHSP90inExDressionanllcanceVulvarLichenSclerosusandVulvarSquamousCellJ一'●UarClnomaObjectiveHeatshockproteins(heatshockprot

8、eins，HSPs)alsoknownasstressproteins，biologicalcells(including