微生物转化法制备γ癸内酯研究论文

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1、摘要丫．癸内酯是香精香料行业广泛应用的一种调香原料，利用生物法生产的丫一癸内酯产品更为天然、安全，是目前的发展趋势。本文以从自然界筛选可转化蓖麻油生成丫-癸内酯的酵母菌株J1为出发菌株，利用原生质体紫外诱变技术提高丫-癸内酯的转化率，，研究了微生物二次转化法制备y．癸内酯的新工艺以及Y．癸内酯的提取及检测方法，主要结论如下。‘1．从桃树林土壤及桃子表面筛选能够利用蓖麻油生成丫。癸内酯的菌种，经初筛、复筛确定酵母菌J1和J2具有分解蓖麻油的能力，与保藏的酿酒酵母、解脂假丝酵母、耐酒精酵母进行比较，酵母菌J1对蓖麻油的转化率最

2、高，经初步鉴定，J1为子囊菌纲、酵母目、酵母科、毕赤酵母属。2．以Jl为出发菌株进行原生质体紫外诱变，确定了原生质体形成和诱变的最佳条件：菌龄16h，酶解浓度1％，酶解时间50min，酶解温度280C，15W紫外灯，30锄处照射25min。经初筛和复筛，得到丫．癸内酯高产菌株M6，该菌株遗传稳定性良好，最适生长温度为30。C，最适生长pH为5—6。利用该菌株进行发酵，以蓖麻油为底物，丫．癸内酯产量达到1．25∥L，比出发菌株提高了28．8％。3．确定了一次转化菌株M6的发酵培养基为：蓖麻油4％，葡萄糖15∥L，酵母浸出汁2

3、．5∥L，蛋白胨2．5∥L，KH2P041．2∥L，MgS040．3∥L，Na2HP041．0∥L，表面活性剂O．4％；培养条件为：培养温度30。C，接种量10％，装液量50m耽50mL，摇床转速200r／min，起始pH6．0。二次转化中，按8％接种量，接种一次转化12h的转化液进行二次转化试验。4．分别以丙酮、乙酸乙酯、四氯化碳、『F己烷及乙醚等不同有机溶剂对丫．癸内酯进行提取，结果表明，正己烷的萃取效果最好，含量达到1．58∥L。超临界萃取的最佳条件为：温度300C，压力10MPa，时间1．5h，此时丫一癸内酯产量达

4、到2．98∥L，比有机溶剂萃取法提高了88．6％，转化率达到30．5％，该方法更为安全高效，利于实现天然香料的绿色生产。关键词：蓖麻油；Y．癸内酯；原生质体；紫外诱变；二次转化；超临界萃取ABSTRACT．GaIT吼a—decalatoneiscomm01lly1lsedinthenaV0rsindus仃ybecauseofitss仰ngpeachodour．Howev％inCreasingd锄aIldfornaturalnaVorSCoInpoundshaS饥couragednlescientistst0study觚d卵

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