mad2β在胃癌多药耐药中的作用及分子机制

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1、独稠牲奔甥8872《6秉承学较严谨的学风与tIc良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作硬取得的研究威果。尽我所知，除了文中特剐加以标注和致谢的地方9p，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究域果，不包含本人或他^已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工1乍的同志对本研究所辙的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不宴之处，本八承担一切相关责任。论文作者签名：jk盈垄日期：Ⅻ正：6保护镛谖产权声骣本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：硼究生在

2、较攻读学位期问论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离较后，发表论文或使用论文工1f成果时署名单位仍然为第四军医大学。学较可以公布论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容除9})，可以采用影印，缩印或其他复制手段保存论文。学较有权允许论文被查网和借阋。并在校园喇上提供论文内容的浏览相下载服务。论文作青虢枉客越甓师躲鲣日期第蹲鬻医太学辫士学位论文英文缩写英文全称ADRCDDPcDNAD董漤CDMSoDTTECLED呵AEGFFcMHRp‰劐阪D2MDRMMCMRP缩瘸语表AdriamycinCispI甜ncom

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4、仪辣根过氧化物酶千道尔顿蠢篓努裘浃貉疆滞蛋爨2多药酣药丝裂獯素-cMul僦rug∞si啦mce∞sociatedpfotein多药耐药相关蚤白第鲤翠医大学博士学位论文MTTNCPAGEP8SP-静PIPMSFSOST肄SVCRVP—16Te仃∞∞lIurnblueNitrocelluIose嚷唑菔硝酸奸维素Polyacrylmi曲辨1electrophoresis聚荫烯酰胺凝胶电泳魏os馥蹴b峨}s痰inoP．瘿ycop似e讯PropidiumiodidePhenylmetIlylsulfonylnuoridesodi强

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6、研究所先前研究发现，胃癌耐药细胞中存在MAD2的选择性剪接体MAD2B。在胃癌细胞SGC7901中表达外源性的MAD2B，可以促进胃癌细胞sGc7901对化疗药物的耐受力，降低阿霉素在核内的蓄积，减轻药物诱导的细胞周期阻滞与凋亡。鉴于MAD2B能提高胃癌细胞SGC7901对药物的抵抗力，我们推测纺锤体检测点参与维持胃癌细胞对化疗药物敏感性，而且关键蛋白MAD2的状态至关重要。MAD2可以识别“化疗药物引起的信号”，引起细胞周期阻滞，继而诱发清除机制，而功能异常的MAD2B则不能识别这种错误，放任胃癌细胞通过有丝分裂。本研

7、究在上述基础上，旨在进一步证实姒D2B促进胃癌多药耐药的作用，探讨姒D20参与胃癌耐药的分子机制，深入研究纺锤体检测点关键蛋白MAD2在胃癌化疗中所起的作用及调控机制。最终为深入理解胃癌细胞转导化疗药物损伤信号的分子机制，阐明胃癌多药耐药的发生提供有益的补充。【目的】1．进一步证实mD2B促进胃癌多药耐药的作用，并研究其相关机制。2．明确纺锤体检测点在维持胃癌化疗疗效中的重要作用。3．探讨MAD2调控胃癌细胞化疗敏感性的分子机制。【方法】1．应用westernblot方法检测胃癌细胞SGc7901及耐药细胞SGC790l

8、／ADR，SGC7901／VCR中MAD2及MAD20的蛋白表达情况，并观察3第辨军藏大学禧士学往论文SGc790i步卜源往表达漱D2§厢，黼D2的表达变化。2．构建两对MAD2小干扰RNA的真核表达载体(分别针对MAD2第3或第4个外显子)，转染耐药细胞SGC790l／ADR，sGc790l／vCR，G418筛选，