大鼠在体心脏心肌缺血后处理模型的研究

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1、中文摘要大鼠在体心脏心肌缺血后处理模型的研究摘要目的：通过建立大鼠在体心脏心肌缺血再灌注损伤（MyocardialIschemiaReperfusionInjury，MIRI）模型，采用不同时间的缺血后处理（ischemicpostconditioning，IPO），观察大鼠心肌梗死面积、心肌酶、心电图及血流动力学的变化，寻找产生最佳心肌保护作用的大鼠在体心脏缺血后处理方式，建立稳定的大鼠在体心脏缺血后处理模型。方法：选择81只250-300克实验用Sprague-Dawley(SD)大鼠（雄性），随机分成9组：I/R组(缺血再灌注损伤组，n=

2、9)，阻断冠状动脉左前降支(1eftanteriordescending,LAD)40分钟，再灌注120分钟；缺血预处理组(ischemicpreconditioning，IPC，n=9)，三次短暂阻断/再通LAD(闭塞5分钟，再灌注10分钟，循环三次)，阻断LAD40分钟，再灌注120分钟；IP0组(缺血后处理组)，分为六个亚组，于阻断LAD40分钟后分别行3次不同时间的IPO：（A）IPOAI-p3-10s组(n=9)：再通10秒，阻断10秒，重复三次，再灌注120分钟；（B）IPOAI-p3-20s组(n=9)：再通20秒，阻断20秒，重

3、复三次，再灌注120分钟；（C）IPOAI-p3-30s组(n=9)：再通30秒，阻断30秒，重复三次，再灌注120分钟；（D）IPOAI-p3-40s组(n=9)：再通40秒，阻断40秒，重复三次，再灌注120分钟；（E）IPOAI-p3-50s组(n=9)：再通50秒，阻断50秒，重复三次，再灌注120分钟；（F）IPOAI-p3-60s组(n=9)：再通60秒，阻断60秒，重复三次，再灌注120分钟；NC组（空白对照组，n=9）。所有动物术前禁食、水4小时，全麻后仰卧位固定，连接四肢心电电极，气管切开，呼吸机辅助，胸部正中切口，剪开胸骨，

4、显露心脏。所有动物第一次阻断LAD前分别给予肝素500单位/公斤，以防止血栓形成，经胸廓壁在左室心尖部无血管区置入穿刺套管针，连接压力传感器及监测仪，记录心电图及左室内压变化。观测指标：1血清生化指标：①CK-MB测定：各组于冠状动脉再灌注前15分钟和120分钟末分别从颈动脉取血，在全自动生化分析仪上测定CK-MB。②SOD测定：各组于冠状动脉再灌注前15分钟和120分钟末分别从颈动脉取血，分离血清，-20℃保存待测。2心肌梗死面积测定：取血毕，迅速取下心脏，原位阻断LAD，经主动脉逆灌1中文摘要Even’s蓝，分离出左室心肌行横切片，TTC法

5、染色，分离坏死区与非坏死区后称重，梗死范围以坏死心肌质量占缺血心肌质量的百分比表示。3血流动力学指标：在LAD阻断前15min、LAD再灌注15min、60min、120min，共4个时间点，分别用RM6240C生理信号采集系统记录心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)和左心室内压下降最大速率(-dp/dtmax)的波形及数值，所有数据均以均数±标准差表示,用SPSS13.0统计软件对数据进行分析处理。结果：1血清生化指标：①CK-MB测定结果表明：CK-MB基础水平

6、在各组并无差别。在再灌注120分钟血CK-MB水平在IR组、IPC组、IPO组各亚组均较同时刻空白对照组显著升高，表明各组均存在缺血再灌注损伤，但IPC组及IP0组各亚组均低于IR组(P<0．05)，且IPO各亚组之间、IPC组与IPO各亚组之间均无明显差别，提示3轮10秒、20秒、30秒、40秒、50秒、60秒的后处理具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。②SOD测定结果表明：SOD基础水平在各组并无差别。在再灌注120分钟IPC组与IPO组各亚组血SOD含量较同时刻对照组均显著降低,IPC组与IPO组各亚组均高于IR组(P<0.05)，但IPO

7、各亚组之间、IPC组与IPO各亚组之间均无明显差别。2心肌梗死范围结果表明：IPC组、IPO组各亚组心肌梗死范围均低于IR组(P<0.05)；IPO组各亚组之间，IPOAI-p3-40s组心肌梗死范围低于其余5组后处理组(P<0.05)；IPO组各亚组与IPC组之间，IPOAI-p3-40s组心肌梗死范围与IPC组无显著差别(p>0.05)，其余5组后处理组心肌梗死范围均高于IPC组(P<0.05)，提示40秒的缺血后处理相比其它5组后处理能进一步减少心肌梗死范围，与IPC之间无差别(p>0.05)。3血流动力学变化：缺血前各组动物的HR、LV

8、DP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax之间无差别。各组HR、LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax在再灌注15min内下降