vegf在神经病理性疼痛大鼠脊髓的表达及其对伤害性刺激反应的易化作用

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1、山东大学硕十学位论文ⅦGF在神经病理性疼痛大鼠脊髓的表达及其对伤害性刺激反应的易化作用硕士研究生：王加真导师：高建新专业：生理学中文摘要目的1．观察大鼠坐骨神经慢性结扎损伤模型(chronicconstrictionofsciaticnerve，CCI)对伤害性热板刺激和机械压力刺激的缩爪反应；2．探讨VEGF及其Flk．1受体在大鼠神经病理性疼痛中的作用。3．了解VEGF蛋白在CCI大鼠脊髓表达的时间依赖性变化。方法1．建立CCI大鼠模型。根据Bcnntt和Xie在1988年创建的模型，即在无菌条件下分离大鼠股二头肌，暴露左

2、侧坐骨神经主干8"～10mm，然后用4-0铬制肠线每间隔1．0"--1．5mm疏松结扎坐骨神经1次，共结扎4次，结扎强度以引起大鼠小腿肌肉轻度颤动和不影响神经外膜的血运为度。结扎神经后仔细止血并逐层缝合。假手术组按照同样方法暴露坐骨神经，但不结扎坐骨神经。2．行为学测试。手术后第7天用智能热板仪(RB．200，温度维持在52℃)和电子压痛仪(Ⅵ-100)测量大鼠后爪足底对热和机械刺激的缩爪反应潜伏期(HWLs)，以评价该大鼠慢性神经病理痛模型是否成功。将行为学方法测试HWLs确定成功的模型大鼠，纳入实验。实验时，在给药前先测试

3、大鼠双侧HWLs3次，取其平均值作为前对照即给药前值，再分别测试给药后5、10、15、20、30、45、60min的HVCL$。将给药后不同时间的HWLs换算成变化百分比，即：(给药后值一给药前值)／给药前值x100％。3．采用免疫组织化学方法染色及图像处理软件检测假手术组和CCI组手术后1d、3d、5d、7d、14d和28d六个时间段大鼠L4．5脊髓组织VEGF蛋白的表达。结果1．正常大鼠与CCI大鼠的HWLs的比较山东大学硕士学位论文正常对照组大鼠左、右两侧后爪足底对热板刺激的HWL均值分别为4．524-0．19和4．54

4、4-O．18；其对机械压力刺激的HWL均值分别为5．12士O．39和5．16士O．40。比较该组大鼠左、右两侧后爪足底对热板刺激和机械压力刺激的HWLs，经统计学处理无显著性差异。CCI大鼠组左、右侧后爪足底对热板刺激的HWL均值分别是2．864-0．12和3．634-0．16，对机械压力刺激的HWL均值分别是2．65士0．83和3．784-0．24。与正常对照组比较，CCI大鼠组左、右侧后爪对热板刺激和机械压力刺激的HVCLs差异具有非常显著的统计学意义(P

5、2．鞘内注射VEGF缩短CCI组大鼠双侧后爪足底对伤害性刺激的HWLs35只CCI大鼠随机分成4组：一组为对照组，三组为VEGF组。对照组(n_9)：鞘内注射101ttl生理盐水；VEGF组又分为：实验A组(n-8)：鞘内注射0．1nmolVEGF；实验B组(n-9)：鞘内注射0．2nmolVEGF实验C组(n--9)：鞘内注射0．4nmolVEGF。(1)鞘内注射VEGF缩短CCI大鼠后爪足底对机械压力刺激反应的HWL对照组大鼠左、右侧后爪对机械压力刺激反应的HWL分别为：Flettneit=0．57，F,i洲出=0．56。

6、实验组鞘内注射0．1nmolVEGF大鼠左、右侧后爪对机械压力刺激反应的HWL分别为：F№，left=0．52和Fri醇州出=O．30，与对照组比较，无显著性差异(P>0．05)。鞘内注射O．2nomlVEGF大鼠左、右侧后爪足底对机械压力刺激反应的HWL分别为：FI刚eft=15．40和Fri洲ght=15．01；鞘内注射O．4nmolVEGF大鼠左、右侧后爪足底对机械压力刺激反应的HWL分别为：FlefVlefl--19．03和Fright／right=18．60。分别与对照组比较，鞘内注射VEGF(O．2和O．4nm01

7、)大鼠后爪足底对机械压力刺激的HWL明显缩短，经统计学处理具有非常显著性差异(P

8、板刺激反应的HWL分别为：FleiVlett=98．43和FrighV,i#--92．32；鞘内注射0．4nmolVEGF大鼠左、右侧后爪足底对热板刺激反应的HWL2山东大学硕士学位论文分别为：Fl删cft=125．22和Ftight／right--118．56。与对照组比较