披针叶黄华生物碱的成分分析与其生物活性的实验的研究

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1、摘要披针叶黄华为豆科野决明属、多年生草本植物【1】【21。披针叶黄华是一种有毒植物，动物采食其种子和全草会引起中毒，严重者发生死亡【3l。但它也是有名的药用植物，其所含的生物碱成分在医药和农药领域有广阔的应用前景。当前，关于该植物的中毒机理尚不明确，这给动物中毒后的预防和治疗带米困难。已知引起家畜披针叶黄华中毒主要是其生物碱成分，故对其生物碱成分的系统分析和生物活性的研究有助于我们认识其中毒机理，并为合理开发利用该植物提供依据【4lIS]。本论文对其生物碱成分进行了提取、分离、鉴定，获得了纯度较高的单体生物碱，并研究了单体生物碱成分对小鼠的急

2、性毒性作用和体外对细胞的毒性作用。具体内容如下：1．披针叶黄华生物碱提取及TLC分析方法一用热回流提取法，方法二用超卢提取法，以85％乙醇为溶剂从披针叶黄华草粉中提取得出生物碱浸膏，浸膏用I％HCL酸化，过滤得酸水液。酸水液用氯仿萃取除去杂质后，用NaOH调pH至lO～11，得碱水液。碱水液依次用氯仿、正丁醇萃取，同收溶剂分别得氯仿部分、正丁醇部分。TLC分析各部分生物碱。经实验得出，披针叶黄华热回流法出膏率为9．2％，得碱率为0．497％；超声法出膏率为10．4％，得碱率为0．534％。TLC检测显示，氯仿提取部分含7种生物碱，正丁醇部分含

3、4种生物碱，正丁醇部分不含黄华碱等小极性生物碱。2．披针叶黄华生物碱的硅胶柱柱层析分离和GC．MS分析应用硅胶柱柱层析分离披针叶黄华总碱成分，使总碱中极性不同的生物碱分离开来。收集其在试管中形成的结晶。获得了两种结晶。使用GC．MS色谱分离总碱，结果表明其至少含7种生物碱成分。3．披针叶黄华生物碱结晶的纯化与鉴定收集由柱层析分离得到的结晶，经重结晶，获得两种纯度较高的结晶。对照黄华碱和金雀花碱标准品，使用GC．MS、红外光谱仪分析对结品进行结构鉴定，确定结晶I为黄华碱，结晶II为四氢脱氧阿艮亭碱。4．黄华碱的毒性研究研究了黄华碱经腹腔途径注射

4、小鼠，引起的小鼠急性毒性实验。测得小鼠黄华碱腹腔注射半数致死量为273．2mg／kg，小鼠中毒症状以呼吸道症状最为严重，病理变化以肺、肝、肾的急性充血、出血为特征。5．披针叶黄华生物碱的体外细胞毒性实验研究通过MTT比色法，以羟喜树碱为阳性对照，测定了黄华碱、四氢脱氧阿艮亭碱对正常BHK细胞和SW480癌细胞的体外细胞毒性作用。结果发现四氢脱氧阿艮亭碱表现出较强的抑制肿瘤细胞生长作用，随着剂量的增加，抑制率也明显增加。羟喜树碱对BHK、SW480细胞的毒性作用明显，在各浓度组均有较好抑制。黄华碱对BHK细胞毒性低，对SW480细胞有一定抑制作

5、用。关键词：披针叶黄华，成分分析，黄华碱，细胞毒性AbstractThermopsislanceolate，akindofherbaceousplantbelongingtotheleguminoseaeplantsofthermopsis，isapoisonousplant．IfAnimaleatitsseedsandGrass，itwillcauseintoxicationandevendeathinseriouseases．Butitisalsoakindofwell-knownmedicinalplants，itsalkaloidsh

6、aveabroadapplicationprospectsinthefieldofmedicineandpesticide．Atpresent，themechanismoftheplantintoxicationisnotclear,whichbringsdifficultiestothepreventionandtreatmentofanimalpoisoning．LivestockpoisoningofThermopsislanceolataismainlycausedbyalkaloidscomponents，SOasystematic

7、analysisofalkaloidsandreseachonitsbiologicalactivitywillhelpusunderstandthemechanismofpoisoningandprovidetheevidenceforrationaldevelopmentandutilizationoftheplant．Experimentsconducteditsalkaloidsofextraction，separationandidentification，andaccessedtothehiIgherpurityofasingle

8、alkaloids．1rIledissertationstudiesthealkaloidsontheacutetoxiceffectsinmiceandinvit