土壤中苄嘧磺隆降解菌的筛选与诱变驯化

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1、摘要土壤中苄嘧磺隆降解菌的筛选及诱变驯化农药学专业硕士研究生翟雨淋指导教师邓新平教授(摘要)苄嘧磺隧适用于水稻插秧田和直播田防除鸭舌草、眼予草、节节菜、陌上菜、矮慈姑等蠲时杂草，以及警毛草、异型莎革、水莎革、碎米莎草、萤蔺等莎荤辩杂草，具有高效、广谱、低毒及低用量等优点，是目前广泛用于稻田杂草防治的主要除草剂之一。苄嘧磺隆除草剂选择性强，生物活性高，对不同作物的敏感性差异很大，因而残留的苄嘧磺隆对敏感作物易产生药害。本试验通过在土壤中富集培养、分离出对苄嘧磺隆具有较好降解作用的微生物，进一步通过诱交驯化方法，以提高其苄嘧磺隆的降解熊力，为今后利用微生物治理苄嘧磺隆的相关研究提供一

2、定参考。主要结论如下：1耐药菌的驯化培养和分离透过逐步提嵩苄瞳磺隆浓度进行羽曩：培养，经反复涂板、划线分离，褥到了37株熊耐受700mg／L苄嘧磺隆的菌株，其中污染土壤中分离得到21株，农田生土中分离到16株。2降解效果溅定采用HPLC法(配紫夕}检测器)，在C18反相柱(250ramX4．6ram)、流动提乙腈+0．5％冰醋酸：55+45(VI+V2)、流速：lmL／min、检测波长254nm、柱温30"C、进样摄20／旺L的条搏下，对37株耐药菌对苄噻磺隆的降解效果进行测定，以采盘l基tJtl篱阳农药厂排污I：21污染土壤中分离的C06菌株降解效果最好，其降解率为32．4％。

3、经西南大学植保学院植物病理研究室鞫大连宝生物有限公司，采用缀菌形态学释分J予生物签定，确定C06菌株属类芽孢杆菌科，短短芽孢杆菌属细菌(Brevibacillus)。3．最佳培养条件通过一系列实验，得到适合C06在苄嘧磺隆环境下生长的最适条件为：以500me／L浓度的苄嘧磺隆为C源和N源，最适生长温度29"C，最适生长pH值7．0。3诱变驯化成果通过对C06菌株进行紫外诱变和化学诱变，获得两株诱变菌uv40-60与m3—60，分别是在254nm40W紫外灯照射60s和化学诱变剂MNNG在pH-7．5处理60min詹得到，其西南大学硕士学能论文对苄噬磺隆的降解率达至438。9％和3

4、5。2％。综上所述，本研究筛选得到了对苄嘧磺隆具有较好降解效果的菌株C06，经～次紫外线和化学诱变，在一定程度上提离了蓥株的降解麓力，虽然提高幅度并不是十分理想，艇至少证明采用诱变方式以提高菌株对苄嘧磺隆降解能力的方式是可行的。如果能够适当增加诱变次数，辅以逐渐增加苄嘧磺隧的弱化培养，有望得到更高降髂能力的菌株。此研究结果不仅为苄嘧磺隆降鳃菌的筛选、培育提供了重要的理论依据，也为其他农药离效降解菌的选育提供了方法参考。2关键词；苄嘧磺隆：诱变驯化；降解菌；筛选；高效液相色谱摘要ScreeningofBensulfuron-—methylDegradingBacteriainSoi

5、landMutagenizingMastercandidate：ZhaiYulinAdvisor：ProfessorDengXinpingAbstractBensulfuron-methylisforcontrollingweedsinplantingricefields，suchasMonochoriavaginalis，Potamogetondis蠢nctus，andsewfam莲yweedssuchasSagittariapygmaeaandCyperaceae，etc．，bensulufuron-methylisconsideredasakindofhighefficie

6、ncy，wildused，lowtoxicandlow-dosageherbicide，whichis硝茈lyusedinriceweedcontrollingandoneoftheprimaryherbicides．Bensulfuron·methylisofhighselectivityandbiologicalactivity；itssensitivityvariesfromcropstocrops；therefore，thechemicalinjuriesaxeeasytobetakenplacebyresidualBensulfuron—methylonsensitiv

7、ecrops．Thewayofenrichmentcultivationinsoil，isolatesthedegradingmicrobeforBensulfuron-methylisadoptedinthisstudy．Then，theeffectsofdegradingmicrobeofBensulfuron-methylWeredeterminedbyHPLConebyone．Thebestdegradingbacteriawasrelegatedtointerrelat