双黄连注射液对大鼠cyp的影响

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1、郑州大学2009届硕士学位论文中文摘要水)，分别断头处死，立即取出肝脏，用钙沉淀法制备肝微粒体，Bradford法测定微粒体蛋白浓度。3.肝微粒体体外温孵系统肝微粒体体外温孵系统的组成为:肝微粒体，NADPH，OPZ，磷酸盐缓冲液(pH7.4)。温孵系统总体积为200oL。肝微粒体蛋白浓度为0.ZmgmL一‘，NADPH的终浓度为1~ol.L一’，oPz的终浓度为4卿ol.L一’，用0.lmol.L一’磷酸盐缓冲液(pH7.4)定容至终体积。37℃水浴中预孵smin后加入NADPH开始反应。4.样品处理及色谱条

2、件孵育Zomin后，加入200林l冰冷的乙睛，涡旋305终止反应。12000印m离心10min，取30林l上清液进样分析。色谱条件:色谱柱5脚DiamonsiLC18柱(4.6~xZoo~);流动相:甲醇:乙睛:0.lmol·L一，乙酸按溶液=10:35:55(v:v:v);柱温:25℃;流速:1.omLmin一，;检测波长:302nm。5.双黄连注射液对大鼠肝微粒体CYP的体外影响实验将不同体积双黄连注射液加入到空白肝微粒体温孵系统中，经肝微粒体温孵系统反应及样品处理后，取30川注入高效液相色谱仪进样分析。以

3、oPZ的转化程度(Tumover，TR)作为酶活性的指标，评价体外实验中双黄连注射液对大鼠CYP活性的影响。6.黄岑昔对大鼠肝微粒体CYP的体外影响实验将不同浓度黄琴营加入到空白肝微粒体温孵系统中，经系统反应及样品处理后，取30川注入高效液相色谱仪进样分析。评估黄答普对CYP的影响，考察双黄连注射液对CYP的影响与其质控成分黄答昔的关系。7.双黄连注射液对大鼠肝微粒体CYP的体内影响实验HPLC法分别测定对照组和双黄连注射液给药组大鼠肝微粒体温孵系统中OPZ的浓度，采用独立样本t检验分析两组酶活性的差异，P<0

4、.05作为检验标准，评估体内实验中双黄连注射液对CYP的影响。结果1.双黄连注射液对大鼠肝微粒体CYP的体外影响实验将双黄连注射液加入到空白肝微粒体温孵系统中，浓度分别为0、0.5、1、郑州大学2009届硕士学位论文中文摘要1.5、2、2.5、3.001·100闪一I时，TR值分别为:477.07士14.r3、324.15土13.65、258.74士12.96、201.32士21.60、100.89士4.68、84.84士10.13、68.67士21.76pmol.min一‘，mg-’。结果表明，cYP的活性随

5、双黄连注射液的浓度的升高而降低。IC5o为0.9601·10001一’。2.黄琴昔对大鼠肝微粒体CYP体外影响实验将黄荃昔加入到空白肝微粒体温孵系统中，浓度分别为O、6、10、15、20、25、30、35mg·mL一，时，e钟的TR值分别为:419.47士27.52、298.89士9.20、279.55士16.09、211.21士10.91、163.31士63.54、115.71士19.56、102.29士22.24、2一81士3.sopmol·min一，·mg-，。结果表明，eYP的活性随黄答营的浓度的升高而

6、降低。Ies。为12.5909·10001一’。3.双黄连注射液对大鼠肝微粒体CYP的体内影响实验用HPLC法测定对照组和给药组大鼠肝微粒体温孵系统中OPZ的含量。对照组和给药组大鼠TR值分别是295.96士13.63pmol·min一，·mg一，和204.73士23.62pmol.min一，，mg一，(又士:)。经独立样本t检验，给药组大鼠酶活性显著低于对照组(尸<0.05)，表明双黄连注射液对CYP有抑制作用。结论1.体外实验中，双黄连注射液及其质控成分黄答昔对CYP均有抑制作用。2.体内实验中，双黄连注射

7、液对CYP也有抑制作用。关键词:双黄连注射液;黄答营;cYP;抑制作用郑州大学2009届硕士学位论文英文摘要TheneffeetsofShuanghuanglianinjectiononCYPinratsPostgraduate:Yu协/eiFanSuPervisor:Prof.QiaoHaiLingandGuoYuZhongDePartmentofCliniealPharinaeology，SchoolofBasicMedieal，ZhengZhouUniversity，Zhengzhou，450052Abs

8、tractCytochromep450(CYp)，which15akindofofmixedfunetionoxidase，caneatalyZemanykindsofreactionsinthebody.ThisCYPenz卿etakesP叭indrugmetabolismof75一80Pereentandeliminatesmedieamentsof65一70Pereentinth